[发明专利]一种生产无岩藻糖基化蛋白的基因工程细胞系及其建立方法有效
申请号: | 201710641279.5 | 申请日: | 2017-07-31 |
公开(公告)号: | CN107217042B | 公开(公告)日: | 2020-03-06 |
发明(设计)人: | 魏化伟;黄亚杰 | 申请(专利权)人: | 江苏东抗生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12P21/00;C12R1/91 |
代理公司: | 北京预立生科知识产权代理有限公司 11736 | 代理人: | 李红伟;高倩倩 |
地址: | 226400 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 无岩藻糖基化 蛋白 基因工程 细胞系 及其 建立 方法 | ||
1.一种生产无岩藻糖基化蛋白的基因工程细胞系,其特征在于,所述基因工程细胞系是Slc35c1基因沉默和 Fut8基因沉默的细胞系,所述细胞系选自:人、猴子、猿、仓鼠、大鼠、小鼠细胞。
2.根据权利要求1所述的基因工程细胞系,其特征在于,所述蛋白是含有Fc区的蛋白。
3.根据权利要求2所述的基因工程细胞系,其特征在于,所述基因工程细胞系中含有编码含有Fc区的蛋白的核苷酸序列。
4.根据权利要求1所述的基因工程细胞系,所述基因工程细胞系含有Cas9基因序列。
5.根据权利要求1所述的基因工程细胞系,所述基因工程细胞系含有针对Slc35c1基因的sgRNA的基因序列和针对Fut8基因的sgRNA的基因序列。
6.权利要求1-5中任一项所述的基因工程细胞系的建立方法,其特征在于,所述建立方法包括如下步骤:敲除细胞中的Slc35c1基和Fut8基因,获得Slc35c1基因沉默和Fut8基因沉默的细胞系。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述建立方法包括如下步骤:利用CRISPR/Cas9技术敲除细胞中的Slc35c1基因和Fut8基因,获得Slc35c1基因沉默和Fut8基因沉默的细胞系。
8.一种制备无岩藻糖基化蛋白的方法,其特征在于,所述方法包括利用权利要求1-5中任一项所述的基因工程细胞系。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)根据权利要求6或7所述的建立方法获得Slc35c1基因沉默和Fut8基因沉默的基因工程细胞系;
(2)将蛋白的编码序列导入步骤(1)获得的基因工程细胞系中。
10.权利要求1-5中任一项所述的基因工程细胞系在制备无岩藻糖基化的蛋白中的应用。
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