[发明专利]一种表达L.mesenteroides来源的蔗糖磷酸化酶重组枯草芽孢杆菌有效
| 申请号: | 201710637427.6 | 申请日: | 2017-07-31 |
| 公开(公告)号: | CN107236696B | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
| 发明(设计)人: | 吴敬;吴丹;朱洁;王淼淼;宿玲恰 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
| 主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/54;C12N15/75;C12P19/44;C12R1/125 |
| 代理公司: | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张勇<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 表达 mesenteroides 来源 蔗糖 磷酸化酶 重组 枯草 芽孢 杆菌 | ||
1.一种基因工程菌,其特征在于,以保藏编号为CCTCC M 2016536的枯草芽孢杆菌为宿主,以pBSMuL3为表达载体,表达蔗糖磷酸化酶;所述蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示,核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.构建权利要求1所述的基因工程菌的方法,其特征在于,将如SEQ ID NO.2所示的蔗糖磷酸化酶基因与表达载体连接,转入枯草芽孢杆菌中。
3. 权利要求1所述基因工程菌在生产蔗糖磷酸化酶中的应用,其特征在于,所述应用是将权利要求1所述基因工程菌接种至发酵培养基中,于30~35℃,200~250 rpm培养24~72h。
4.权利要求1所述基因工程菌在生产α-熊果苷中的应用。
5.根据权利要求4所述应用,其特征在于,所述应用是将权利要求1所述的基因工程菌培养24~48 h后的发酵液离心得到粗酶液;以摩尔比为1:1~8的对苯二酚和蔗糖为底物,按5000~10000 U/g底物的添加量加入酶液,于30~35℃,pH 6.8~7.2反应12~48 h。
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