[发明专利]一种表达L.mesenteroides来源的蔗糖磷酸化酶重组枯草芽孢杆菌有效

专利信息
申请号: 201710637427.6 申请日: 2017-07-31
公开(公告)号: CN107236696B 公开(公告)日: 2019-11-26
发明(设计)人: 吴敬;吴丹;朱洁;王淼淼;宿玲恰 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/54;C12N15/75;C12P19/44;C12R1/125
代理公司: 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 代理人: 张勇<国际申请>=<国际公布>=<进入国
地址: 214122 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 表达 mesenteroides 来源 蔗糖 磷酸化酶 重组 枯草 芽孢 杆菌
【权利要求书】:

1.一种基因工程菌,其特征在于,以保藏编号为CCTCC M 2016536的枯草芽孢杆菌为宿主,以pBSMuL3为表达载体,表达蔗糖磷酸化酶;所述蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示,核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.构建权利要求1所述的基因工程菌的方法,其特征在于,将如SEQ ID NO.2所示的蔗糖磷酸化酶基因与表达载体连接,转入枯草芽孢杆菌中。

3. 权利要求1所述基因工程菌在生产蔗糖磷酸化酶中的应用,其特征在于,所述应用是将权利要求1所述基因工程菌接种至发酵培养基中,于30~35℃,200~250 rpm培养24~72h。

4.权利要求1所述基因工程菌在生产α-熊果苷中的应用。

5.根据权利要求4所述应用,其特征在于,所述应用是将权利要求1所述的基因工程菌培养24~48 h后的发酵液离心得到粗酶液;以摩尔比为1:1~8的对苯二酚和蔗糖为底物,按5000~10000 U/g底物的添加量加入酶液,于30~35℃,pH 6.8~7.2反应12~48 h。

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