[发明专利]一种谷胱甘肽分子检测用试纸条及检测方法

说明书

一种谷胱甘肽分子检测用试纸条，所述结合垫须经以下步骤处理：1）将纳米颗粒氨基化制得的氨基化的纳米颗粒、羟甲基琥珀酰亚胺化的生物素水溶液于37℃下混合反应30min，沉淀分离，所得沉淀物经水洗得生物素化的纳米颗粒；2）将上述生物素化的纳米颗粒加水分散，再向该体系中加入纳米片层溶液混合，沉淀分离，所得沉淀物经水洗得生物素化纳米颗粒/纳米片层复合物；3）将生物素化纳米颗粒/纳米片层复合物与吐温20的水溶液混合，并涂于结合垫上干燥即可。本发明操作简单便捷，对GSH的选择性较好；检测时间短，仅需10min即可，且检测准确性高。

技术领域

本发明属于纳米材料技术、侧流层析技术、生物分析技术领域，具体涉及一种谷胱甘肽分子检测用试纸条及检测方法。

背景技术

GSH (谷胱甘肽) 是人体内重要的非蛋白类含巯基化合物，广泛存在于哺乳动物和真核细胞中。谷胱甘肽在生物系统中提供重要功能，如：降低细胞内的自由基水平、维持新陈代谢过程、去除新陈代谢过程中产生的有毒物质、平衡细胞内氧化还原压力。研究表明，人体中谷胱甘肽的水平与许多疾病，如：细胞凋亡、衰老、心脏病、帕金森、老年痴呆症等症状密切相关。因此，为满足临床和医学需要，快速灵敏地检测谷胱甘肽含量成为日益紧迫的研究课题。到目前为止，许多谷胱甘肽检测方法被报道出来。目前常用的GSH 含量的检测方法有高效液相色谱法（HPLC）、表面增强拉曼光谱法（SERS）、毛细管电泳法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法等。这些已建立的方法在定量检测谷胱甘肽中具有重要的优势，然而这些检测方法操作繁琐费时，成本较高，且需要专业的人员操作。

发明内容

本发明目的在于提供了一种谷胱甘肽分子检测用试纸条，同时提供谷胱甘肽分子检测方法是本发明的又一发明目的。

基于上述目的，本发明采取了如下技术方案：

一种谷胱甘肽分子检测用试纸条，所述试纸条包括基板，所述基板上依次设置样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜上标记链霉亲和素检测线，所述结合垫须经以下步骤处理：

1）将纳米颗粒氨基化制得的氨基化的纳米颗粒、羟甲基琥珀酰亚胺化的生物素水溶液于37℃下混合反应30min，沉淀分离，所得沉淀物经水洗得生物素化的纳米颗粒；

2）将上述生物素化的纳米颗粒加水分散，再向该体系中加入纳米片层溶液混合，沉淀分离，所得沉淀物经水洗得生物素化纳米颗粒/纳米片层复合物；

3）将生物素化纳米颗粒/纳米片层复合物与吐温20 的水溶液混合，并涂于结合垫上干燥即可。

所述样品垫和结合垫均由玻璃纤维膜制成；所述基板为PVC 板。

所述链霉亲和素的浓度为0.1～5mg/mL；样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫的长度分别为26mm、6mm、20mm 和33mm；试纸条的宽度为3.9 mm。

步骤1）中，沉淀分离时，先加入异丙醇混合，再离心分离即可。

步骤1）中，所述氨基化的纳米颗粒的浓度为0.01～2μM，羟甲基琥珀酰亚胺化的生物素水溶液的浓度为2～1000μM；氨基化的纳米颗粒与羟甲基琥珀酰亚胺化的生物素水溶液的体积比为200 μL：（200～300）μL。

步骤2）中，纳米片层溶液的浓度为0.3～0.4mg/mL；纳米片层溶液与氨基化的纳米颗粒的体积比为200μL：（60～80）μL。

步骤3）中，采用真空干燥，干燥温度为37℃。

步骤3）中，吐温20 水溶液中吐温20 的体积百分比含量为1%～5%。