[发明专利]一种谷胱甘肽分子检测用试纸条及检测方法有效
申请号: | 201710632593.7 | 申请日: | 2017-07-28 |
公开(公告)号: | CN107543809B | 公开(公告)日: | 2019-12-10 |
发明(设计)人: | 李朝辉;黄钟明;陈娟;葛佳;张琳 | 申请(专利权)人: | 郑州大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N33/558 |
代理公司: | 41126 郑州立格知识产权代理有限公司 | 代理人: | 田小伍;任伟柯 |
地址: | 450001 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 谷胱甘肽 分子 检测 试纸 方法 | ||
1.一种谷胱甘肽分子检测用试纸条,其特征在于,所述试纸条包括基板,所述基板上依次设置样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述硝酸纤维素膜上标记链霉亲和素检测线,所述结合垫须经以下步骤处理:
1)将纳米颗粒氨基化制得的氨基化的纳米颗粒、羟甲基琥珀酰亚胺化的生物素水溶液于37℃下混合反应30min,沉淀分离,所得沉淀物经水洗得生物素化的纳米颗粒;
2)将上述生物素化的纳米颗粒加水分散,再向该体系中加入纳米片层溶液混合,沉淀分离,所得沉淀物经水洗得生物素化纳米颗粒/纳米片层复合物;
3)将生物素化纳米颗粒/纳米片层复合物与吐温20的水溶液混合,并涂于结合垫上干燥即可。
2.如权利要求1所述的谷胱甘肽分子检测用试纸条,其特征在于,所述样品垫和结合垫均由玻璃纤维膜制成;所述基板为PVC板。
3.如权利要求1所述的谷胱甘肽分子检测用试纸条,其特征在于,所述链霉亲和素的浓度为0.1~5mg/mL;样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫的长度分别为26mm、6mm、20mm和33mm;试纸条的宽度为3.9mm。
4.如权利要求1所述的谷胱甘肽分子检测用试纸条,其特征在于,步骤1)中,沉淀分离时,先加入异丙醇混合,再离心分离即可。
5.如权利要求1所述的谷胱甘肽分子检测用试纸条,其特征在于,步骤1)中,所述氨基化的纳米颗粒的浓度为0.01~2μM,羟甲基琥珀酰亚胺化的生物素水溶液的浓度为2~1000μM;氨基化的纳米颗粒与羟甲基琥珀酰亚胺化的生物素水溶液的体积比为200μL:(200~300)μL。
6.如权利要求1所述的谷胱甘肽分子检测用试纸条,其特征在于,步骤2)中,纳米片层溶液的浓度为0.3~0.4mg/mL;纳米片层溶液与氨基化的纳米颗粒的体积比为200μL:60μL~80μL。
7.如权利要求1所述的谷胱甘肽分子检测用试纸条,其特征在于,步骤3)中,采用真空干燥,干燥温度为37℃。
8.如权利要求1所述的谷胱甘肽分子检测用试纸条,其特征在于,步骤3)中,吐温20水溶液中吐温20的体积百分比含量为1%~5%。
9.如权利要求1所述的谷胱甘肽分子检测用试纸条,其特征在于,所述纳米颗粒为水溶性金纳米簇、水溶性银纳米簇、水溶性铜锌铟/硫化锌量子点、水溶性硒化镉/硫化锌量子点、碳量子点和石墨烯量子点中的一种;且所述纳米颗粒的荧光发射波长为400nm~750nm;所述纳米片层为二氧化锰纳米片层或氢氧化氧化钴纳米片层。
10.一种谷胱甘肽分子检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
i)将不同浓度的谷胱甘肽标准液滴加到权利要求1-9任一所述的试纸条上跑样10~30min,测定不同浓度下标准液的荧光强度值A;
ii)以谷胱甘肽标准液的浓度为横坐标、荧光强度值A为纵坐标作图,在一定浓度范围内经线性拟合得谷胱甘肽标准曲线和拟合方程;
iii)将未知浓度的待测样品滴加到所述试纸条上跑样10~30min,检测荧光强度值A1,将该荧光强度值A1代入拟合方程计算得到待测样品的浓度。
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