[发明专利]五味子活性提取物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物活性物质提取领域，具体是五味子活性提取物的制备方法。

背景技术

五味子，始载于《神农本草经》，列为上品，为木兰科植物五味子的干燥成熟果实，具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心等功效，主产于辽宁、黑龙江、吉林等地。研究表明五味子主要含有木脂素类成分，具有保肝降酶、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、降血压以及调节免疫等作用，用于治疗消化系统、心血管系统、中枢神经系统、生殖系统以及泌尿系统等疾病。鉴于其确切的药理作用，五味子被广泛应用于中医临床方剂和中药制剂中。因此，研究五味子木脂素类成分提取工艺可为有效利用其资源提供科学依据。目前虽有多篇文献报道了五味子木脂素的提取工艺，但有的采用有机溶剂进行提取，不适合工业化生产；有的提取方法不可靠，提取物中木脂素类成分含有量和转移率较低，造成资源浪费，并影响临床使用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种五味子活性提取物的制备方法，采用廉价的乙醇溶液进行提取，适合工业化生产，提取物中木脂素类成分含有量和转移率高，五味子木脂素的提取率高，并且最后能分别得到五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素，产品质量高。

本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：五味子活性提取物的制备方法，包括回流提取、浓缩水沉、吸附、洗脱和干燥。回流提取步骤为在五味子粉末中加入6~9倍体积的85~95%乙醇回流提取1~4次，每次回流提取时间为100~150min。采用廉价的乙醇溶液对五味子活性物质进行提取，可减少生产成本，适合工业化生产；本发明生产工艺简单，每一步操作均有准确数据，重现性好，产品质量稳定；乙醇低毒，提取得到的五味子活性物质的安全性高，绿色安全。

作为优选，浓缩水沉步骤为在8~15℃，1~3KPa条件下浓缩4~8h，加入五味子粉末体积3~6倍的纯水，在0~4℃常压下静置3~6h进行水沉，第一次高速离心。低温条件下浓缩，保护五味子木质素的活性。五味子木脂素为脂溶性物质，根据相似相容性质，随着纯水的加入，五味子木脂素在液体中的溶解度快速下降，以晶体形式析出；同时水沉法可去除大部分乙醇提取的五味子活性物质中的色素、维生素和有机酸等水溶性成份，达到纯化五味子木脂素的目的。

作为优选，吸附步骤为在浓缩水沉步骤得到的上清液中加入五味子粉末重量的15~25%，搅拌吸附0.5~3h，第二次高速离心取活性炭，向活性炭中加入85~95%的乙醇，加入量为五味子粉末重量的8~15倍，溶液加热至50~80℃，搅拌洗脱1~3h，第三次高速离心取上清液。先利用活性炭对上清液中的五味子木脂素进行特异性吸附，起到富集的作用，再利用高浓度乙醇溶液进行洗脱，对五味子木脂素进行回收，从而提高五味子木脂素的提取率。

作为优选，洗脱步骤包括合并第一离心得到的沉淀和第三次离心得到的上清液，低温真空浓缩后上样于大孔吸附树脂柱，加20~30％乙醇水溶液洗脱3~5个柱体积，加75~85％乙醇水溶液洗脱6~10个柱体积，合并含有五味子木脂素的流分，减压回收溶剂至干，加入1~4倍体积的正己烷溶解，放置1~3d，第一次抽滤，取固体；滤余液为五味子木脂素结晶母液，在滤余液中加入15~30wt%活性短肽，静置0.4~0.8h，第二次抽滤，得到的固体与第一次抽滤得到的固体合并，为五味子木脂素粗品；所述大孔吸附树脂为AB-8型大孔吸附树脂。在低浓度乙醇溶液中AB-8型大孔吸附树脂对五味子木脂素的吸附率高，可洗脱去除剩余的五味子油和挥发油；在高浓度乙醇溶液中AB-8型大孔吸附树脂选择性地吸附水溶性杂质而不吸附五味子木脂素，成功地将五味子木脂素纯化。AB-8型大孔吸附树脂洗脱过程中，五味子木脂素转移率达99％以上，得到的五味子木脂素纯度达90％以上。

作为优选，活性短肽的氨基酸序列为QSGFCTSYCYCLSKFNLTICYCLHCSS。上述活性短肽可明显提高五味子木脂素的极性，相似相容，五味子木脂素在正己烷中的溶解度大幅下降，从而达到对滤余液中的五味子木脂素进行富集回收的目的。同时，活性短肽与五味子木脂素之间通过范德华力或氢键紧密结合，活性短肽将五味子木脂素进行包裹，保护其活性，因此，不必再加入辅料，降低成本。