[发明专利]检测铁皮石斛中多菌灵及甲基硫菌灵残留方法

说明书

技术领域

本发明涉及化学检测领域，具体涉及一种检测铁皮石斛中多菌灵及甲基硫菌灵残留方法。

背景技术

铁皮石斛在栽培过程中有时会发生病虫鼠害，特别是高温高湿季节，病虫害繁殖快，种植过程中，铁皮石斛病原性病害主要有真菌性病害、细菌性病害等；炭疽病通常是由于栽植过密、通风不良和环境闷热引起，主要危害叶片，导致叶面出现黑色病斑，发病严重时可导致落叶，严重影响铁皮石斛的生长；此外在夏季高温高湿或基质偏酸时(种植一段时间后基质会腐烂酸化)易发生白绢病，此病发生时，在基质表面可见绢状菌丝，并且中心部位形成褐色菜籽样菌核，植株近基质的茎上会出现黄色至淡褐色的病斑，感染部位腐烂变软，植株很快死亡和腐烂，形成毁灭性危害。通过对铁皮石斛种植基地的调研发现，针对此类症状，基地常选用多菌灵与甲基硫菌灵对铁皮石斛感染炭疽病和白绢病进行防治。

多菌灵又称苯并咪唑44号、棉萎灵等，是一种高效低毒、广谱、内吸性杀菌剂，是代替铜、汞类杀菌剂的理想叶面喷洒剂和种子处理剂，对菌核病、炭疽病、枯萎病等都有防治效果，是中药栽培过程中常用的农药。多菌灵化学性质稳定，能通过作物叶片和种子渗入植物体内，耐雨水冲洗，残效期长。因此，多菌灵在药材中的残留是影响产品质量的重要因素。国内外对果蔬中的多菌灵残留量检测已有大量报道，但对中药材及制剂中多菌灵残留量的分析报道较少。甲基硫菌灵是一种广谱性内吸低毒杀菌剂，具有内吸、预防和治疗作用。内吸性比多菌灵强，甲基硫菌灵按其化学结构属取代苯类杀菌剂。

多菌灵和甲基硫菌灵对人体的危害对人、畜有一定毒性可引起抽搐、恶心呕吐等症状。因此，检测铁皮石斛中多菌灵与甲基硫菌灵农药残留量，确保铁皮石斛用药安全是具有必要性的。

发明内容

本发明提出了一种可快速测定铁皮石斛中多菌灵与甲基硫菌灵农药残留量，且有机试剂消耗少，操作更为简单方便的测量方法。

为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种检测铁皮石斛中多菌灵及甲基硫菌灵残留方法，包括以下步骤；

(1)对照品溶液制备：精密称取多菌灵5mg，甲基硫菌灵2.5mg，置同一10mL量瓶中，加乙腈溶解并定容至刻度，摇匀后，精密量取5mL置于另一10mL量瓶中，用乙腈稀释至刻度，得对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：精密称量铁皮石斛样品粉末10.0g，置50mL具塞离心管中，加水5mL，0.1％甲酸乙腈15mL，振摇2min后，加入4g无水硫酸镁，5g氯化钠后，再次涡旋5min，静置片刻，第一次离心分离后取上清液5mL，加入50mg无水硫酸镁、150mgN-丙基乙二胺、50mg十八烷基硅胶和20mg石墨化炭黑，涡旋5min，静置并第二次离心分离后取上清液2mL，即得供试品溶液；

(3)检测：将步骤(1)中所得对照品溶液和步骤(2)中所得供试品溶液分别放入液相色谱仪中进行色谱分析，得到色谱图分析检测结果。

优选的，所述液相色谱仪中色谱柱参数waters C18，流动相：乙腈与0.02mol/L乙酸铵组成的缓冲溶液；流速为1mL/min，柱温为35℃，进样体积为10μL，检测波长为280nm。

优选的，步骤(2)中所述第一次离心分离的转速为1000r/min，离心分离时间为5min；第二次离心分离的转速为1000r/min，离心分离时间10min。

优选的，所述乙腈与0.02mol/L乙酸铵的比例为20:80。

优选的，所述waters C18的规格型号为粒径5μm，内径4.6mm，柱长150mm。

优选的，所述色谱图中峰面积为多菌灵及甲基硫菌灵相应的残留含量。

本发明检测铁皮石斛中多菌灵及甲基硫菌灵残留方法，其有益效果在于：采用基质分散固相萃取法，能够大大降低有机试剂的消耗，且操作方便，检测稳定性好。针对于多菌灵及甲基硫菌灵的检测具有专属性，检测稳定、精密度高，重复性好，为铁皮石斛安全用药提供了可靠的依据。

附图说明

图1为实施例2中所得的色谱图；

图2为实施例3中线性关系考察HPLC图；

图3-1和图3-2分别为实施例3中多菌灵和甲基硫菌灵分工作曲线；

图4为实施例3中多菌灵及甲基硫菌灵检出限色谱图；

图5为实施例3中多菌灵及甲基硫菌灵定量限色谱图；

图6为实施例4中重复性试验HPLC图；

图7为实施例5中稳定性考察HPLC图。

具体实施方式

下面结合具体实施例及附图来进一步详细说明本发明。