[发明专利]一种辅酶Q10纯品的制备方法

说明书

本发明涉及一种辅酶Q10纯品的制备方法，其工艺步骤为：首先将辅酶Q10发酵液经陶瓷膜微滤和喷雾干燥得到粗品，然后将该粗品用丙酮浸提，所得浸提液分相、减压浓缩得到辅酶Q10提取浓缩液，之后用石油醚萃取、硅胶柱层析、减压蒸馏浓缩洗脱液，最后加入辅酶Q10晶种结晶，减压干燥即可得到辅酶Q10纯品。本发明采用陶瓷膜微滤、喷雾干燥方法粉碎菌丝，再经丙酮回流浸提、陶瓷膜过滤器分离，将菌丝细胞破壁、分离，富集辅酶Q10，该方法可提高提取收率7%以上，有利于经济效益提高；该方法简便，适合工业化生产；本方法减少废水排放量，有利于环保处理。

技术领域

本发明属于生物发酵提取技术领域，特别是涉及一种辅酶Q10纯品的制备方法。

背景技术

辅酶Q10(CoenzymeQ10),又称泛醌,分子式C₅₉H₉₀O_4，分子量863.4，具有醌式结构,是一种类维生素。辅酶Q10具有自由基清除、改善细胞内呼吸、增强免疫等功能。临床上可用于癌症的辅助治疗；用于治疗冠心病、心衰、心率失常等各种心脏病，对急慢性病毒肝炎、糖尿病、牙松动、肌无力、再生障碍性贫血、胃十二指肠溃疡、帕金森综合症等多种疾病也有辅助疗效。随着对其应用研究的不断深入，辅酶Q10在医药、食品添加剂、保健等领域的广泛应用。目前，世界辅酶Q10用量逐年急剧增加，市场需求量极大。

辅酶Q10的生产方法主要有化学合成法、植物细胞培养法和微生物发酵法。微生物发酵法具有工艺稳定性高,易于控制,产品纯度高，产率高，易于大规模的生产。因此,利用微生物发酵法生产辅酶QIO，是生产工艺发展的主流。

辅酶Q10在室温下呈黄色或淡黄色的结晶，熔点48～52℃，对光不稳定,易分解为微红色的物质,对湿度和温度不敏感,较稳定。辅酶Q10在甲醇和水中不溶，在乙醇中微溶，在乙醚、丙酮中溶解，在正己烷、氯仿、苯、四氯化碳等溶剂中易溶。

辅酶Q10是一种酯溶性类维生素，利用微生物发酵法生产辅酶QIO主要存在菌体细胞内，仅有少量分泌到细胞外。现有技术中，对于此类辅酶Q10的提取，公开的报道有：

1、醇碱皂化提取法，首先将辅酶Q10发酵液离心分离得到的菌丝体，加入含有焦没食子酸、乙醇、氢氧化钠、正己烷的体系中，回流提取，菌丝中游离脂肪酸、脂肪酸甘油脂皂化水解转入水相，而酯溶性强辅酶Q10转入低极性的正己烷中，再经石油醚多次萃取，辅酶Q10转入石油醚-正己烷有机溶媒体系中，将有机溶媒提取液水洗至中性，真空浓缩旋转蒸发去除有机溶剂，用无水乙醇溶解，滤过，加水沉淀、过滤，得到辅酶Q10纯品。该工艺中，由于长时间皂化回流，易导致辅酶Q10中甲氧基与乙醇中的乙氧基换位，生成单或双乙氧基衍生物，影响辅酶Q10提取产量和质量。

2、碱化皂化提取法，首先将辅酶Q10发酵液离心分离得到的菌丝体，先后经酸性水、碱水回流，用有机溶媒萃取，将有机溶媒提取液水洗至中性，真空浓缩旋转蒸发去除有机溶剂，用无水乙醇溶解，滤过，加水沉淀、过滤，得到辅酶Q10纯品。该工艺中，不生成单或双乙氧基衍生物，但萃取过程乳化严重，影响萃取收率和质量。

3、有机溶剂搅拌破碎提取法，首先将辅酶Q10发酵液离心分离得到的菌丝体，加入丙酮，强力搅拌，离心，取上清液，用真空浓缩旋转蒸发去除丙酮，加入石油醚或者正己烷多次萃取得到辅酶Q10提取液，将提取液用真空旋转蒸发器浓缩至浓绸液，加入无水乙醇，冷冻降温、静置沉淀、过滤，回收滤液，加水沉淀、过滤，得到辅酶Q10纯品。本工艺中，丙酮搅拌破碎时间短，辅酶Q10释放收率低，丙酮搅拌破碎时间长，辅酶Q10易变性，影响产品质量。