[发明专利]西瓜品种“京美”的特异性鉴定方法

说明书

本发明公开了一种西瓜品种“京美”的特异性鉴定方法。本发明所提供的西瓜品种“京美”的特异性鉴定方法包括如下步骤：以西瓜品种“京美”的基因组DNA为模板，采用28个核心SSR引物对分别进行PCR扩增，将扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，根据电泳图谱构建“0，1”矩阵(在凝胶相同迁移率位置上，有条带的记为“1”，无条带的记为“0”)；同样方法获得待测西瓜的“0，1”矩阵；将待测西瓜的“0，1”矩阵与“京美”的“0，1”矩阵进行比对。本发明构建的“京美”的“0，1”矩阵进与其他品种完全不同，能灵敏、高分辨地将其与其他品种区分，可有效用于“京美”的真伪鉴定，为“京美”的知识产权保护提供了有效的科学依据。

技术领域

本发明属于蔬菜育种与应用技术，涉及一种西瓜品种“京美”的特异性鉴定方法。

背景技术

西瓜不仅是北京市农民就业增收的高效园艺作物，也是满足城乡居民生活需求的重要时令水果。随着西瓜产业的蓬勃发展，对于优质西瓜品种的需求越来越大。但是，巨大的利益驱使，导致西瓜市场混乱，“同物异名、同名异物”现象普遍存在，这给西瓜品种的知识产权保护、种子质量管理和新品种认定带来了很大的困难。

为了规范市场并保护育种者的权益，需要对西瓜品种进行科学鉴定和评价。但目前缺乏简单高效的品种特异性检测手段，迫切需要研制一种简便、快速、准确的西瓜种质资源鉴定评价技术及标准方法，以作为新品种保护的技术基础和授权的科学依据。

传统的品种特异性测试主要以形态特征为基础，受环境影响大、稳定性差，测试周期长，严重影响特异性测试的有效性和权威性。分子标记因具有多态性高、测试周期短、不受环境影响等显著优势，成为品种特异性审查和品种鉴定的发展方向。目前，简单重复序列SSR(simple sequence repeats)技术具有共显性、准确率高、稳定性好等特点，因此，SSR分子标记在西瓜品种特异性评价中具有良好的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种西瓜品种“京美”的特异性鉴定方法。

本发明所提供的西瓜品种“京美”的特异性鉴定方法，可包括如下步骤：

(A)建立西瓜品种“京美”的特异性分子身份证，包括如下步骤：

(A1)以西瓜品种“京美”的基因组DNA为模板，采用28个核心SSR引物对分别进行PCR扩增，得到扩增产物。

其中，所述28个核心SSR引物对及每个引物对在西瓜种质资源范围内对应的理论上所有可能扩增片段的大小分别为如下a1)-a28)：

a1)由序列1和序列2所示两条DNA单链组成的引物对1；267bp、259bp、246bp；

a2)由序列3和序列4所示两条DNA单链组成的引物对2；164bp、162bp、160bp、156bp；

a3)由序列5和序列6所示两条DNA单链组成的引物对3；150bp、140bp；

a4)由序列7和序列8所示两条DNA单链组成的引物对4；140bp、134bp；

a5)由序列9和序列10所示两条DNA单链组成的引物对5；166bp、157bp；

a6)由序列11和序列12所示两条DNA单链组成的引物对6；170bp、133bp；

a7)由序列13和序列14所示两条DNA单链组成的引物对7；229bp、221bp；

a8)由序列15和序列16所示两条DNA单链组成的引物对8；178bp、163bp；

a9)由序列17和序列18所示两条DNA单链组成的引物对9；279bp、269bp；