[发明专利]与吊白块特异结合的核酸适配体Sf-B09及其应用

说明书

本发明公开了与吊白块特异结合的核酸适配体Sf‑B09及其应用，所述核酸适配体是单链DNA，由82个核苷酸组成，其SEQ ID NO：2所示；其二级结构含有突出的环和茎，且存在G‑四链体结构，其中Sf‑B09吉布斯自由能DG=‑11.42；该核酸适配体通过酶联寡核苷酸吸附试验验证都能特异性检测到吊白块；具有简单、快速、灵敏等特点，10‑15分钟内即可出结果，无需使用抗体和仪器设备、操作简单、特异性好、结果容易判读、制作方便。

技术领域

本发明涉及一种与吊白块特异结合的核酸适配体Sf-B09及其应用，属于生物医学技术领域。

背景技术

吊白块，系以福尔马林结合亚硫酸氢钠再还原制得，化学名甲醛合次硫酸氢钠(Sodium FormSf-B09ldehyde SulfoxylSf-B09te，SFS)，分子式NSf-B09hSO₂·Ch₂O·2h₂O，分子量154.12，结晶性粉粒有机化合物。它易溶于水，在常温下较为稳定，其水溶液在60℃以上开始分解出有害物质，120℃高温下可分解产生甲醛、二氧化硫和硫化氢等有毒气体，有强还原性，有漂白作用。

甲醛次硫酸氢钠对人体有害，属于非食品用原料。其毒性与其中的甲醛和二氧化硫有关，食用掺有甲醛次硫酸氢钠的食品，会损伤人的肝脏、肺脏、肾脏，严重的导致癌症和畸形病变。甲醛是细胞原浆毒，能使蛋白质凝固，口服甲醛溶液(10-20)mL，可致人死亡。长期接触低浓度的甲醛蒸汽可出现头晕、头痛、乏力、嗜睡、食欲减退、视力下降等。中毒以呼吸系统和消化道损伤为主要特征；并有弱的麻醉作用。甲醛急性中毒表现为喷嚏、咳嗽、视物模糊、头晕、头痛、乏力、口腔黏膜糜烂、上腹痛、呕吐等症状，随病情加重，出现声音嘶哑、胸痛、呼吸困难等，严重者出现咽喉与肺部水肿、昏迷、休克。长期皮肤接触，可引起接触性皮炎。口服中毒者表现为胃肠道黏膜损伤、出血、穿孔，可出现脑水肿，代谢性酸中毒，昏迷及休克等症状。研究表明，甲醛易与细胞内亲核物质反应形成加合物，并引起DNSF-B09-蛋白质交联。造成DNSF-B09复制过程中某些重要基因丢失，导致DNSF-B09损伤。长期接触甲醛者鼻腔与鼻咽部发生肿瘤增多。国际癌症研究组织(ISF-B09RC)1995年将甲醛列为对人体(鼻咽部)可能的致癌物(Group2SF-B09)。甲醛次硫酸氢钠的毒性为，大鼠经口LD₅₀(半数致死量)>2g/kg体重。人经口摄入纯甲醛次硫酸氢钠10g就会中毒致死，甲醛次硫酸氢钠也是一种致癌的物质，所以甲醛次硫酸氢钠早已被我国明令禁止在食品中使用，属非食品用原料。

由于甲醛次硫酸氢钠对食品有防腐及保色等作用，一些不法生产商仍然在食品生产、加工等环节中使用甲醛次硫酸氢钠，主要添加腐竹、豆皮、豆腐、面粉、米粉、银耳、牛筋、蜜枣、白糖、冰糖、饵丝干等。为保证广大人民群众的身体健康，打击不法生产者，食品中甲醛次硫酸氢钠的检测非常重要，建立一种准确可靠、灵敏快速、广泛适用的检测方法在食品安全工作中尤为重要。

核酸适配体是经过指数富集配体系统进化技术(SyStemSf-B09tic evolution ofligSf-B09ndS by exponentiSf-B09l enrichment，SELEX)筛选得到的能与金属离子、小分子、生物大分子，甚至整个细胞高专一性和亲和性结合的SSDNSF-B09或ＲNSF-B09分子。核酸适配体不仅具备抗体分子的识别特性，凡是涉及抗体的诊断领域，几乎都可以用核酸适配体来代替，而且还具备自己独特的优异性能，其具有靶分子范围广、分子质量小、免疫原性低、易于化学合成、改造和标记等优点。核酸适配体及其相关筛选技术(SELEX)，核酸适配体近年来在治疗新药、药物运输、癌细胞检测、生物成像、生物标志物的发现、毒品检测、抗病毒等生物医学领域中的应用。

发明人将本发明的吊白块特异性核酸适配体的核苷酸序列和基因数据库进行了比对搜索，未发现有任何相同序列信息。