[发明专利]一种测定饲料中淀粉糊化度的方法

说明书

技术领域

本发明属于淀粉糊化度测定技术领域，涉及一种测定饲料中淀粉糊化度的方法。

背景技术

淀粉在常温下不溶于水，但当水温升高至53℃以上时，淀粉的物理性质会发生明显变化。淀粉在高温下溶胀、分裂形成均匀糊状溶液的过程，称为淀粉的糊化。未经糊化的淀粉分子，其结构呈微晶束定向排列，这种淀粉结构状态为β型；通过蒸煮或挤压，达到物化温度时，淀粉充分吸水膨胀，以致微晶束解体，排列混乱，这种淀粉结构状态为α型。淀粉结构状态由β型转化为α型的过程即为淀粉的糊化，也称为α化。通俗地说，淀粉的糊化就是由生变熟的过程。在粮食食品、饲料的生产中，由于淀粉的糊化程度高低会影响复水时间，进而影响食品或饲料的品质，因而常常需要了解产品中淀粉的糊化程度，即由生变熟的程度。

淀粉糊化度是表示淀粉糊化程度的指标，是指淀粉中的糊化淀粉占全部淀粉量的百分比，淀粉糊化度会直接影响畜禽吸收利用饲料中能量物质的效率，从而影响畜禽的生长性能。因此，测定饲料中的淀粉糊化度非常重要。快速准确地测定饲料中的淀粉糊化度，进而监控膨胀玉米、熟化玉米等原料及配合料的品质，能够为原料的采购和验收提供参考数据，同时对饲料品质的安全性具有重要意义。

目前，尚未有对饲料中淀粉糊化度进行测定的国家标准，而各企业对淀粉糊化度的测定方法各不相同，常用的淀粉糊化度测定方法主要有分光光度计法及滴定法。其中，分光光度计法在加入磷钼酸试剂时，易受到加样速度的影响，导致最终生成的物质易沉淀，进而对分光光度计的比色结果影响较大，并且对操作者的要求较高，操作难度较大；而滴定法需准确判定滴定终点，同样对操作者的要求较高，不利于推广应用。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种操作简便且重复性好的测定饲料中淀粉糊化度的方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，该方法具体包括以下步骤：

1)将待检测的饲料样品粉碎后筛分，得到试样；

2)取3个容器，向其中2个容器中加入等量试样，分别作为全糊化样品及待测定样品，另一个容器作为空白样品；

3)分别向全糊化样品、待测定样品及空白样品中加入缓冲液，并混合均匀；

4)将全糊化样品置于沸水浴中加热0.5-1.5h，之后冷却至室温；

5)分别向全糊化样品、待测定样品及空白样品中加入酶溶液，并于35-45℃下加热0.5-1.5h；

6)分别向全糊化样品、待测定样品及空白样品中加入硫酸溶液，并混合均匀；

7)分别向全糊化样品、待测定样品及空白样品中加入钨酸钠溶液，混合均匀后静置，并过滤去除沉淀；

8)分别向全糊化样品、待测定样品及空白样品中加入3,5-二硝基水杨酸试剂，混合均匀后，置于沸水浴中加热3-8min，冷却后进行比色测定，并计算得到淀粉糊化度。

步骤1)中，所述的试样的粒径小于0.425mm。

步骤1)中，所述的试样先用石油醚或乙醚洗涤，除去试样中的脂肪，之后再用乙醇洗涤，除去试样中的可溶性糖类。若试样中含有较多脂肪及可溶性糖类，通过增加此处理步骤，能够除去试样中的脂肪及可溶性糖类；对于一般的玉米加工副产物来说，可省略此处理步骤。

步骤2)中，所述的容器为具塞比色管。

步骤3)中，所述的缓冲液为冰醋酸-乙酸钠缓冲液，该冰醋酸-乙酸钠缓冲液中，CH₃COONa的质量浓度为1-1.2g/mL。也可将冰醋酸-乙酸钠缓冲液的pH值调整至4.5±0.05。

步骤5)中，所述的酶溶液为葡萄糖淀粉酶溶液，该葡萄糖淀粉酶溶液的制备过程为：将葡萄糖淀粉酶溶于缓冲液中，并置于振荡器上振荡7-12min，之后过滤去除沉淀即可；每1mL缓冲液中，加入0.005-0.015g葡萄糖淀粉酶。葡萄糖淀粉酶中，以酶活力8万U，酶用量1000-1600U/g为准，若酶的活力降低，则酶用量按比例相应加大。

步骤6)中，所述的硫酸溶液为硫酸-水溶液，该硫酸-水溶液中，H₂SO₄的体积百分含量为8-12％；步骤7)中，所述的钨酸钠溶液为钨酸钠-水溶液，该钨酸钠-水溶液中，钨酸钠的质量浓度为10-15g/mL。硫酸溶液能够使试样中的蛋白质变性，钨酸钠溶液能够使变性的蛋白质沉淀下来，形成更稳定化合物。