[发明专利]一种测定饲料中淀粉糊化度的方法

权利要求书

1.一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，其特征在于，该方法具体包括以下步骤：

1)将待检测的饲料样品粉碎后筛分，得到试样；

2)取3个容器，向其中2个容器中加入等量试样，分别作为全糊化样品及待测定样品，另一个容器作为空白样品；

3)分别向全糊化样品、待测定样品及空白样品中加入缓冲液，并混合均匀；

4)将全糊化样品置于沸水浴中加热0.5-1.5h，之后冷却至室温；

5)分别向全糊化样品、待测定样品及空白样品中加入酶溶液，并于35-45℃下加热0.5-1.5h；

6)分别向全糊化样品、待测定样品及空白样品中加入硫酸溶液，并混合均匀；

7)分别向全糊化样品、待测定样品及空白样品中加入钨酸钠溶液，混合均匀后静置，并过滤去除沉淀；

8)分别向全糊化样品、待测定样品及空白样品中加入3,5-二硝基水杨酸试剂，混合均匀后，置于沸水浴中加热3-8min，冷却后进行比色测定，并计算得到淀粉糊化度。

2.根据权利要求1所述的一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，其特征在于，步骤1)中，所述的试样的粒径小于0.425mm。

3.根据权利要求1所述的一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，其特征在于，步骤1)中，所述的试样先用石油醚或乙醚洗涤，除去试样中的脂肪，之后再用乙醇洗涤，除去试样中的可溶性糖类。

4.根据权利要求1所述的一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，其特征在于，步骤3)中，所述的缓冲液为冰醋酸-乙酸钠缓冲液，该冰醋酸-乙酸钠缓冲液中，CH₃COONa的质量浓度为1-1.2g/mL。

5.根据权利要求1所述的一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，其特征在于，步骤5)中，所述的酶溶液为葡萄糖淀粉酶溶液，该葡萄糖淀粉酶溶液的制备过程为：将葡萄糖淀粉酶溶于缓冲液中，并置于振荡器上振荡7-12min，之后过滤去除沉淀即可；每1mL缓冲液中，加入0.005-0.015g葡萄糖淀粉酶。

6.根据权利要求1所述的一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，其特征在于，步骤6)中，所述的硫酸溶液为硫酸-水溶液，该硫酸-水溶液中，H₂SO₄的体积百分含量为8-12％；步骤7)中，所述的钨酸钠溶液为钨酸钠-水溶液，该钨酸钠-水溶液中，钨酸钠的质量浓度为10-15g/mL。

7.根据权利要求1所述的一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，其特征在于，步骤8)中，所述的3,5-二硝基水杨酸试剂的制备方法为：分别将3,5-二硝基水杨酸及氢氧化钠-水溶液加入至酒石酸钾钠-水溶液中，之后再加入结晶酚及亚硫酸钠，搅拌至固体溶解即可。

8.根据权利要求7所述的一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，其特征在于，所述的氢氧化钠-水溶液中，氢氧化钠的摩尔浓度为1.8-2.2mol/L；所述的酒石酸钾钠-水溶液中，酒石酸钾钠的质量浓度为0.3-0.4g/mL。

9.根据权利要求1所述的一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，其特征在于，步骤8)中，利用紫外可见分光光度计进行比色测定，检测波长为500-580nm。

10.根据权利要求1所述的一种测定饲料中淀粉糊化度的方法，其特征在于，步骤8)中，所述的淀粉糊化度的计算公式为

X=A1A2×100,]]>

其中，X为淀粉糊化度，A₁为待测定样品的吸光度，A₂为全糊化样品的吸光度。