[发明专利]具有高抗原呈递的DC细胞和抗原特异性T细胞及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种具有高抗原呈递的DC细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

提供DC细胞；

在所述DC细胞上负载抗原；以及

向所述DC细胞内导入基因表达沉默剂，所述基因表达沉默剂用于沉默Tao-1蛋白磷酸激酶基因的表达，得到所述具有高抗原呈递的DC细胞；

所述基因表达沉默剂为所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA，且所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA的正义链的碱基序列如SEQ ID No.1所示，所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA的反义链的碱基序列如SEQ ID No.2所示。

2.一种具有高抗原呈递的DC细胞，其特征在于，所述具有高抗原呈递的DC细胞通过如权利要求1所述的具有高抗原呈递的DC细胞的制备方法制备得到。

3.一种抗原特异性T细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

提供DC细胞；

在所述DC细胞上负载抗原；

向所述DC细胞内导入基因表达沉默剂，所述基因表达沉默剂用于沉默Tao-1蛋白磷酸激酶基因的表达，得到具有高抗原呈递的DC细胞；

将T细胞与所述具有高抗原呈递的DC细胞混合，并置于含有四环素的培养基中共同培养；以及

收集共同培养后的所述T细胞，得到所述抗原特异性T细胞；

其中，所述基因表达沉默剂为所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA，且所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA的正义链的碱基序列如SEQ ID No.1所示，所述Tao-1蛋白磷酸激酶的shRNA的反义链的碱基序列如SEQ ID No.2所示。

4.根据权利要求3所述的抗原特异性T细胞的制备方法，其特征在于，所述含有四环素的培养基中，所述四环素的终浓度为0.5mg/mL～5mg/mL。

5.根据权利要求3所述的抗原特异性T细胞的制备方法，其特征在于，所述含有四环素的培养基中还含有终浓度为10ng/mL～1000ng/mL的GM-CSF、终浓度为0.1ng/mL～100ng/mL的IL-4和体积分数为0.1％～20％的血浆。

6.根据权利要求3所述的抗原特异性T细胞的制备方法，其特征在于，所述将T细胞与所述具有高抗原呈递的DC细胞混合，并置于含有四环素的培养基中共同培养的操作中，所述T细胞与所述具有高抗原呈递的DC细胞的个数比为1～20：1，所述共同培养的时间为1天～15天。

7.一种抗原特异性T细胞，其特征在于，所述抗原特异性T细胞通过如权利要求3～6任一项所述的抗原特异性T细胞的制备方法制备得到。

8.如权利要求1所述的具有高抗原呈递的DC细胞的制备方法制备得到的具有高抗原呈递的DC细胞或如权利要求3～6任一项所述的抗原特异性T细胞的制备方法制备得到的抗原特异性T细胞在制备抗肿瘤的药物中的应用。