[发明专利]一种从鸡蛋黄中联合提取IgY、卵黄高磷蛋白、卵磷脂、蛋黄油及脱脂蛋黄粉的方法有效
申请号: | 201710557186.4 | 申请日: | 2017-07-10 |
公开(公告)号: | CN107383187B | 公开(公告)日: | 2020-08-11 |
发明(设计)人: | 蔡朝霞;罗进旭;刘巧;唐世涛;付星;马美湖 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C07K16/02 | 分类号: | C07K16/02;C07K14/465;C07F9/10;C11B1/10 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 徐绍新 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鸡蛋 联合 提取 igy 卵黄高磷蛋白 卵磷脂 蛋黄 脱脂 方法 | ||
1.一种从鸡蛋黄中联合提取IgY、卵黄高磷蛋白、卵磷脂、蛋黄油及脱脂蛋黄粉的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)IgY的提取:将新鲜蛋黄液与水按体积比1∶1-12稀释并调节pH为4-7,搅拌均匀后放入冰箱中静置过夜,离心获取上清液A,下层为蛋黄浆质,随后向上清液A中加入硫酸铵和氯化钠,使IgY盐析并沉淀,接着将离心获取的粗IgY沉淀用蒸馏水溶解,并透析除盐后获得粗IgY水溶液,然后向粗IgY水溶液中加入PEG6000使其重量浓度达到2-10%,并调节pH为3-8,放入冰箱静置后离心获取纯化后的IgY沉淀,最后将纯化后的IgY沉淀用蒸馏水再次溶解,并透析除去PEG6000后获取纯化后的IgY水溶液,冻干后即得IgY固体;
(2)蛋黄总脂质的提取:向步骤(1)获得的蛋黄浆质加入无水乙醇,充分搅拌后进行离心,得到上清液B和沉淀A,将上清液B放入-20℃冰箱过夜结晶析出沉淀B,沉淀B主要为蛋黄脂质2以及水溶性蛋白,通过温水熔化凝固的蛋黄脂质2,使其成为油状液体,再通过离心可将蛋黄脂质2与水溶性蛋白质分开;倒出上清液C并旋蒸除去乙醇,然后通过分液即可获得蛋黄脂质1;向获得的沉淀A中加入乙醇-乙酸乙酯混合溶剂进行萃取,过滤获取滤液1和滤渣1,滤液1旋蒸脱除溶剂获得蛋黄脂质3,混合蛋黄脂质1、2、3进行真空干燥即得蛋黄总脂质;
(3)卵磷脂的提取:向步骤(2)获得的蛋黄总脂质加入乙酸乙酯并在低温条件下结晶后,离心获取沉淀并进行真空干燥即为膏状的卵磷脂;
(4)蛋黄油的提取:将步骤(3)离心获得的上清液D旋蒸脱除溶剂后真空干燥即为蛋黄油;
(5)卵黄高磷蛋白和脱脂蛋黄粉的提取:将步骤(2)获得的滤渣1自然风干,加入重量浓度为10-20%的氯化钠溶液,磁力搅拌0.5-2h,使水溶性的卵黄高磷蛋白充分溶解,然后在50-100℃高温下保温10-30min使其它水溶性杂蛋白变性沉淀,最后过滤获取滤液2和滤渣2,滤液2透析除盐后冻干即得卵黄高磷蛋白,滤渣2自然风干后即为脱脂蛋黄粉,
步骤(1)中,所述硫酸铵和氯化钠在上清液A中的终浓度分别为20-35%和0.1-1%,均为重量浓度,
步骤(2)中,所述乙醇-乙酸乙酯混合溶剂中,乙醇与乙酸乙酯的体积比1∶1-6。
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