[发明专利]一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法

权利要求书

1.一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法，其特征在于，该方法采用如下步骤：

步骤1)：将蛹虫草置于50-70℃条件下烘干至蛹虫草含水量在8％以下，超微粉碎5-15min，获得超微蛹虫草粉；

步骤2)：将步骤1)获得的超微蛹虫草粉加入到浓度为75-100％的乙醇溶液中，充分搅拌溶解，超声30-60min，静置1-12h，置于转速为8000-10000rpm离心机内离心获取上清液，重复1-2次，合并上清液；步骤2)中所述超微蛹虫草粉与浓度为75-100％的乙醇质量比为1:5-20；

步骤3)：将步骤2)合并的上清液旋干获得固体，将固体置于烧杯中，缓慢加入蒸馏水溶解，并充分搅拌，获得浓度为0.9-1.1mg/ml溶液，再将溶液置于转速为8000-10000rpm离心机内离心，获得初步提取液；

步骤4)：按质量份数，将400-600份偶联了Oligo(dT)的磁珠用400-600份水洗涤两次，加入100-300份初步提取液，重置磁珠，置于室温条件下反应5-10min，用磁性分离器进行磁性分离，在磁性分离器上用移液器将上清液弃去；再加入100-300份水，混匀磁珠，用磁性分离器进行磁性分离，在磁性分离器上用移液器移取上清液弃去，重复两次；继续加入50-200份水，混匀磁珠，置于65-100℃水浴加热5-30min，快速置于磁性分离架上，进行磁性分离，快速用移液器移取上清液弃去，获得虫草素溶液。

2.一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法，其特征在于，该方法采用如下步骤：

步骤1)：将蛹虫草置于60℃条件下烘干至蛹虫草含水量在8％以下，超微粉碎10min，获得超微蛹虫草粉；

步骤2)：将步骤1)获得的超微蛹虫草粉加入到浓度为85％的乙醇溶液中，充分搅拌溶解，超声45min，静置8h，置于转速为9000rpm离心机内离心获取上清液，重复1次，合并上清液；

步骤3)：将步骤2)合并的上清液旋干获得固体，将固体置于烧杯中，缓慢加入蒸馏水溶解，并充分搅拌，获得浓度为1.0mg/ml溶液，再将溶液置于转速为9000rpm离心机内离心，获得初步提取液；

步骤4)：按质量份数，将500份偶联了Oligo(dT)的磁珠用500份水洗涤两次，加入200份初步提取液，重置磁珠，置于室温条件下反应8min，用磁性分离器进行磁性分离，在磁性分离器上用移液器将上清液弃去，加入200份水，混匀磁珠，用磁性分离器上进行磁性分离，在磁性分离器上用移液器移取上清弃去，重复两次，加入125份水，混匀磁珠，置于80℃水浴加热18min，快速置于磁性分离架上，进行磁性分离，快速用移液器移取上清液弃去，获得虫草素溶液。

3.根据权利要求2所述的一种蛹虫草活性组分的分离纯化方法，其特征在于：步骤2)中所述超微蛹虫草粉与浓度为85％的乙醇质量比为1:8。