[发明专利]丛枝菌根属真菌的复合培养基和共生包合物及其应用

说明书

本发明公开了一种培养丛枝菌根属真菌的复合培养基、丛枝菌根属真菌的培养方法及其与复合培养基的共生包合物，以及由共生包合物制成的生物有机肥和复合控释肥。所述复合培养基包括腐植酸提取物以及真菌培养基；其中腐植酸提取物是从2％桑根、5％葛根、10％食用菌残余物、80％泥炭和3％褐煤的混合物经发酵提取的。本发明的丛枝菌根属真菌可在复合培养基中离体纯培养，用共生包合物生产生物有机肥和复合控释肥，可作为腐植酸抗逆抗盐碱肥，腐植酸粮食、果蔬专用肥，腐植酸水生生物生长持续利用肥，还有在育苗、花卉、富营养水中NPK、矿物质等的在线提取等多种应用，通过生物防治保护水土环境，提高肥料利用率，应用范围广。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种丛枝菌根属真菌的复合培养基和共生包合物及其应用。

背景技术

丛枝菌根真菌(Aarbuscular mycorrhizal fungi，AMF)能与大多数陆生植物根系形成菌根共生体，其占土壤微生物总生物量的10％以上。AMF从宿主植物获得碳水化合物，同时为植物带来一系列好处，如促进宿主植物的生长、促进植物对磷等养分的吸收、提高植物对干旱、重金属和盐碱的耐受性，还能增强土壤的稳定性与保水性。此外，AMF的存在及多样性是影响植物群落结构、多样性和生产力的主要决定因素，尤其是在退化生态系统中，AMF在植被恢复及重建过程中发挥着至关重要的作用。王义等采用丛枝菌根真菌和腐植酸联合改良土壤的研究(王义等从枝菌根真菌和腐植酸联合作用对矿区沙土改良效应研究，科技导报，2014，(7)：29-34)，宋培玲、郝丽芬、李欣州等运用丛枝菌根真菌特性提高植物抗病性的综述性报道(宋培玲，郝丽芬，李欣州，等.丛枝菌根真菌特性及其提高植物抗病性的研究进展[J].内蒙古农业科技，2013，(3)：84-85)，说明AMF已成为一种新型的微生物肥料，其在减少化肥和农药施用、减少环境污染、提高农作物产量等方面具有不可替代的作用。

当前，利用分子生物学方法对AMF物种多样性进行研究，极大地促进了AMF物种多样性研究，这对于AMF物种多样性的评估和理论研究是非常便利的。但是，通过分子手段得到的仅仅是AMF的DNA或蛋白序列等，而对AMF资源的保护和利用则需依靠形态学方法，从这个意义上讲，将形态学与分子手段相结合才能更好地研究AMF物种多样性。对AMF的形态学研究，首先需要得到AMF的离体纯培养。然而，丛枝菌根属是一类专性活体营养共生菌，通常只有与活体植物根系建立共生才能正常生长。文献(S Cranenbrouck et.al，Methodologies for in Vitro Cultivation of Arbuscular Mycorrhizal Fungi withRoot Organs，In Vitro Culture of Mycorrhizas.Volume 4of the series SoilBiology，2005，VII：341-375)披露了AMF离体培养的胡萝卜根培养体系，另外，专利申请(用于丛枝菌根真菌在液体培养基中连续繁殖和大量生产的体系和方法，申请号201480059125X，申请公布号CN105682449)披露了一种根器官培养物中AMF的体外生产，虽然上述方法都能做到体外培养，但它们仍然不能脱离根器官，只能算半离体的培养方法。如何解决AMF离体纯培养的技术，可能是AMF物种资源保护和与其相关的各种应用首先需要克服的技术瓶颈(刘敏等，丛枝菌根真菌物种多样性研究进展，微生物学通报，2016,43(8):1836-1843)。

发明内容

本发明为了克服目前尚不能使丛枝菌根属离体纯培养的问题，提供了一种含腐植酸提取物的复合培养基，其可以离体纯培养丛枝菌根属真菌两性囊霉属(Ambispora sp.)和原囊霉属(Archaeospora sp.)，还提供一种丛枝菌根属真菌和复合培养基制成的共生包合物，该共生包合物可用于生产腐植酸生物有机肥和腐植酸复合控释肥。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案之一是：一种用于培养丛枝菌根属真菌的复合培养基，所述复合培养基包括腐植酸提取物以及真菌培养基；