[发明专利]丛枝菌根属真菌的复合培养基和共生包合物及其应用

权利要求书

1.一种用于培养丛枝菌根属真菌的复合培养基，其特征在于，所述复合培养基包括腐植酸提取物以及真菌培养基；

所述腐植酸提取物是从2％桑根、5％葛根、10％食用菌残余物、80％泥炭和3％褐煤的混合物经发酵提取的，所述的百分比为占混合物的质量百分比；

所述真菌培养基包括0.3-1％碳源、0.02-0.1％氮源和无机盐，所述氮源为酵母浸出物，所述碳源选自葡萄糖、蔗糖和木糖中的一种或多种，所述无机盐为0.02-0.05％硫酸镁、0.01-0.03％磷酸锌和/或0.01-0.15％磷酸钙，pH为5.5-6.8，所述的百分比为占复合培养基的质量百分比。

2.如权利要求1所述的复合培养基，其特征在于，所述腐植酸提取物占0.365-1.33％，所述氮源为0.1％的酵母浸出物，所述碳源为总量占1％的选自葡萄糖、蔗糖和木糖的一种或多种，所述无机盐为0.05％的硫酸镁，0.03％的磷酸锌和0.15％的磷酸钙，pH为6.8，每kg所述复合培养基补足水和/或生物活性泥炭至其总量为1kg，所述的百分比为占复合培养基的质量百分比。

3.如权利要求2所述的复合培养基，其特征在于，所述腐植酸提取物占复合培养基的0.79％。

4.如权利要求1～3任一项所述的复合培养基，其特征在于，所述腐植酸提取物的发酵提取依次包含以下步骤：

1)用小型锤式破碎机将所述混合物粉碎到不大于80目；

2)发酵温度为20-50℃，发酵时间不少于24小时，压力为0.1-0.5Mpa；

3)发酵后先离心除去沉淀，将上清用孔径0.22-0.45μm亲和纤维膜进行过滤。

5.如权利要求4所述的复合培养基，其特征在于，所述混合物粉碎到20目，发酵温度为28℃，发酵时间为120小时，压力为0.5Mpa；所述离心为10,000×g离心至少10分钟，所述过滤用孔径0.22μm亲和纤维膜进行过滤。

6.一种腐植酸提取物，其特征在于，所述腐植酸提取物是从2％桑根、5％葛根、10％食用菌残余物、80％泥炭和3％褐煤的混合物经发酵提取制得，所述的百分比为占混合物的质量百分比。

7.如权利要求5所述的腐植酸提取物，其特征在于，所述发酵提取依次包含以下步骤：

1)用小型锤式破碎机将所述混合物粉碎到不大于80目；

2)发酵温度为20-50℃，发酵时间为24-240小时，压力为0.1-0.5Mpa；

3)发酵后先离心除去沉淀，将上清用孔径0.22-0.45μm亲和纤维膜进行过滤。

8.如权利要求7所述的腐植酸提取物，其特征在于，所述混合物粉碎到20目，发酵温度为28℃，发酵时间为120小时，压力为0.5Mpa；所述离心为10,000×g离心至少10分钟，所述过滤用孔径0.22μm亲和纤维膜进行过滤。

9.一种丛枝菌根属真菌的培养方法，其包括下述步骤：

1)将按常规方法分离的丛枝菌根属真菌两性囊霉属(Ambispora sp.)和原囊霉属(Archaeospora sp.)在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基中进行培养；

2)将步骤1)中所述的培养基与丛枝菌根属真菌一起移植入如权利要求1或2所述的复合培养基进一步培养。

10.如权利要求9所述的培养方法，其特征在于，所述两性囊霉属包括芬兰双型囊霉(Ambispora fennica)，所述原囊霉属包括薄壁双型囊霉(Archaeospora leptoticha)、崔氏原囊霉(Archaeospora trappei)和/或申克原囊霉(Archaeospora schenckii)。

11.一种如权利要求9或10所述的培养方法制得的丛枝菌根属真菌的共生包合物。