[发明专利]一种蜚蠊中原儿茶酸含量的UPLC测定方法有效
申请号: | 201710544546.7 | 申请日: | 2017-07-05 |
公开(公告)号: | CN107367557B | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 刘越飞;岳碧松;耿介 | 申请(专利权)人: | 四川好医生攀西药业有限责任公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 615000 四川省*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蜚蠊 中原 儿茶 含量 uplc 测定 方法 | ||
1.一种蜚蠊中原儿茶酸含量的UPLC测定方法,其特征在于,所述的测定方法为UPLC检测方法,该方法由以下步骤实现:
a.蜚蠊样品的制备方法:
将干燥的蜚蠊粗粉,每1kg粗粉加4kg水,浸泡1小时后,温度约在70℃,提取三次:第一次8小时,第二次加水3kg,提取6小时,第三次加水3kg,提取4小时,合并三次提取液,过滤,滤液浓缩至相对密度为70℃时1.10~1.20,加入75%~95%的乙醇,70℃保温搅拌30分钟,静置12小时,弃去上层油脂,下层药液过滤,滤液回收乙醇,减压浓缩至相对密度为70℃时1.20~1.25,加入甘油0.5L,充分搅拌均匀,滤过,纯化水定容至10L,即得蜚蠊醇提取物脱脂原液,蜚蠊醇提物脱脂原液经13000r/min高速离心1min,取上清液过膜后,备用;
b.UPLC测定蜚蠊样品中原儿茶酸的条件:
色谱柱:Waters ACQUITY UPLC HSS T3柱,2.1×100mm,1.8μm;
流动相:流动相A为缓冲盐溶液,该缓冲盐溶液含0.1%甲酸和25mmol甲酸铵,流动相B为100%乙腈,进样量:1μL,流速:0.5mL/min,温度:样品检测温度25℃,柱温40℃,检测波长: 254nm,洗脱时间:11min,洗脱程序为:0~1min,99%A:1%B;1~2min,99%~90%A:1%~10%B;2~6min,90%~60%A:10%~40%B;6~7min,60%~20%A:40%~80%B;7~8min,20%A:80%B;8~8.01min,20%~99%A:80%~1%B;8.01~11min,99%A:1%B。
2.权利要求1中所述的一种蜚蠊中原儿茶酸含量的UPLC测定方法,其特征在于,所述的蜚蠊为美洲大蠊。
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