[发明专利]抗LOX-1人源单链抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种抗LOX‑1人源单链抗体及其制备方法和应用，抗LOX‑1人源单链抗体，包括轻链和重链，包含一组CDR：HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3；该组CDR与下述序列至少具有30％的同源性：HCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1；HCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2；HCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3；LCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.4；LCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.5；LCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.6。本发明为动脉粥样硬化早期诊断试剂、靶向载药材料及治疗药物开发提供了理想材料。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种抗LOX-1人源单链抗体及其制备方法和应用。

背景技术

2016年10月8日的柳叶刀杂志公布的全球疾病负担最新数据显示，从1990年到2015年主要死因的排位发生了变化，2015年的主要死因，缺血性心脏病和脑血管疾病分别排在第一和第二位，也就是说，心脑血管疾病已经成为人类的第一杀手。

我国心血管病患病率及死亡率处于上升阶段，“中国心血管病报告2015”中指出，心血管病占居民疾病死亡构成的40％以上，为我国居民的首位死因。心血管病负担日渐加重，已成为重大的公共卫生间题，防治心血管病刻不容缓。

心脑血管疾病的前身是动脉粥样硬化(Arteriosclerosis，As)。多项研究显示：As是经多年无症状发展而突然致残致死的疾病，70％-80％的冠状动脉血栓的形成是继发于As斑块的破裂。特别是最近的临床调查显示，30岁以下却已经出现动脉硬化的病例已有很多。对人类而言，随年龄的增长动脉硬化几乎是不可避免的，但是发病危险因素的有无是疾病进展的关键。As在形成脂纹这种初级阶段的时候是可逆的，经治疗，内腔狭窄和斑块可以回缩；但是随着病变的发展，将逐渐成为不可逆性改变。

As的发生始于血管内皮损伤，氧化型低密度脂蛋白(Oxidized Low DensityLipoprotein，ox-LDL)是导致血管内皮细胞激活、损伤和功能失调的主要危险因子，是As的主要致病因素。而ox-LDL必须通过其存在于血管内皮细胞的特异性受体，即植物凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low density lipoproteinreceptor-1，LOX-1)的介导才能发挥作用。近来研究发现：众多因素能调控LOX-1的病理表达，内皮细胞吞噬与LOX-1结合ox-LDL后触发一系列信息通路，调控转录因子的表达，使黏附分子、炎症因子等表达上调，活性氧表达降低，导致内皮损伤、As等疾病形成。LOX-1是As众多事件的初始阶段，已成为抗As药物研发的强有力新靶点。

目前，已经成功开发出鼠源和鸡源抗LOX-1单克隆抗体(Monoclonal antibody)，而且一系列的动物模型试验结果表明，抗LOX-1单克隆抗体不但能够抑制LOX-1介导的动脉粥样硬化类疾病的发生发展，还可以作为靶向载体用于动脉粥样硬化斑块的显像。虽然抗LOX-1单克隆抗体在动物模型的研究中显示了优越的诊疗效果，但是动物源性单克隆抗体应用于人体治疗时存在诸多问题：一是不能有效地激活人体中补体和Fc受体相关的效应系统；二是被人体免疫系统所识别，产生人抗鼠抗体(human antigen mouse antibody，HAMA)，造成诸多毒副作用；三是在人体循环系统中被很快清除掉，难以达到理想的治疗效果。