[发明专利]闪蒸气相色谱法测定四神丸中指标性成分的方法

说明书

本发明提供了一种闪蒸气相色谱法同时测定四神丸中补骨脂素、异补骨脂素、去氢二异丁香酚、五味子醇甲、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，包括：闪蒸气相色谱法检测四神丸样品获取定性分析结果、外标法建立标准工作曲线、获取四神丸样品中指标性成分的定量分析结果3步；本发明一方面闪蒸气相色谱采用固体样品直接进样，无需复杂提取过程，无溶剂使用，故操作简便，环保；另一方面通过闪蒸气相色谱方法对四神丸中指标性成分进行定量检测，能够有效节省实验时间、简化实验步骤；因此，本发明的质量评价方法具有简单、环保、高效的特点，该检测技术对四神丸质量评价具有十分深远的意义。

(一)技术领域

本发明涉及一种闪蒸气相色谱法测定四神丸中指标性成分的方法，具体涉及一种闪蒸气相色谱法同时测定四神丸中补骨脂素、异补骨脂素、去氢二异丁香酚、五味子醇甲、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法。

(二)背景技术

四神丸是一种中成药名，为固涩剂，具有温肾散寒，涩肠止泻之功效，用于肾阳不足所致的泄泻，症见肠鸣腹胀、五更溏泻、食少不化、久泻不止、面黄肢冷。四神丸是由肉豆蔻、补骨脂、五味子和吴茱萸四味药以及大枣、生胶制成，其中骨脂补命火，散寒邪，为君药；吴茱萸温中散寒，肉豆蔻温暖脾胃，涩肠止泻，均为臣药；五味子收敛固涩，是为佐药；生姜暖胃散寒，大枣补益脾胃，同为使药。

《中华人民共和国药典》(2015版)规定，每克四神丸中补骨脂素和异补骨脂素的含量总和不得少于3mg。补骨脂素和异补骨脂素的含量是中药补骨脂的主要成分，也是《药典》中评价补骨脂生药材的指标性物质。《药典》中对四神丸的质量评价只有补骨脂标志性物质的含量要求，而对其他三味中药(肉豆蔻、五味子和吴茱萸)却没有质量评价。《药典》(2015版)规定，肉豆蔻中挥发油含量不得低于6％，去氢二异丁香酚含量不得低于0.1％；五味子中五味子醇甲的含量不得低于0.4％；吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量之和不得少于0.15％，柠檬苦素的含量不得低于0.2％。由于柠檬苦素是一种苦味物质，其有消炎杀菌的作用，但是不是吴茱萸药材的主要活性成分，因此一般研究较多的是研究吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量。因此，为了对四神丸中的四味中药的指标性成分进行分析，有必要开发一种能同时测定其中补骨脂素、异补骨脂素、去氢二异丁香酚、五味子醇甲、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法。

现有文献对补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素以及五味子中五味子醇甲检测方法，常用的方法有薄层色谱法、液相色谱法、气相色谱法等，对肉豆蔻中的去氢二异丁香酚以及吴茱萸中的吴茱萸碱和吴茱萸次碱采用薄层色谱法和液相色谱法；但需要超临界提取、超声提取等繁琐前处理方式。对四神丸样品中的这些物质的测定，通常采用液相色谱法，除了需要繁琐的提取过程外，对不同物质的检测需要不同检测波长，进一步加大了检测工作量。因此，本发明旨在开发不需前处理且能同时测定四神丸中补骨脂素、异补骨脂素、去氢二异丁香酚、五味子醇甲、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法。

(三)发明内容

本发明目的是提供一种闪蒸气相色谱法同时测定四神丸中补骨脂素、异补骨脂素、去氢二异丁香酚、五味子醇甲、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法。

本发明采用如下技术方案：

一种闪蒸气相色谱法同时测定四神丸中补骨脂素、异补骨脂素、去氢二异丁香酚、五味子醇甲、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，所述方法为：

(1)闪蒸气相色谱法检测四神丸样品获取定性分析结果

将四神丸样品研磨成粉末状装入裂解器中，将裂解器置于气相色谱仪进样口处，当裂解器温度达到300～350℃时进样，用气相色谱仪检测，得到气相色谱图，通过对比标准物质保留时间得到四神丸样品中补骨脂素、异补骨脂素、去氢二异丁香酚、五味子醇甲、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的定性分析结果；