[发明专利]判断PM2.5细颗粒物的生物毒性的方法在审
申请号: | 201710533883.6 | 申请日: | 2017-07-03 |
公开(公告)号: | CN107314955A | 公开(公告)日: | 2017-11-03 |
发明(设计)人: | 奚晔;郝莉鹏;詹铭 | 申请(专利权)人: | 上海市浦东新区疾病预防控制中心 |
主分类号: | G01N15/00 | 分类号: | G01N15/00;G01N21/76 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司31266 | 代理人: | 王正君,马思敏 |
地址: | 200136 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 判断 pm2 颗粒 生物 毒性 方法 | ||
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体地,涉及判断PM2.5细颗粒物的生物毒性的方法。
背景技术
大气中PM2.5细颗粒物是指空气动力学直径≤2.5μm的颗粒物,可通过呼吸沉积在肺泡。近年来研究表明,细颗粒物具有明显的毒性作用,可引起机体呼吸系统、免疫系统等较为广泛的损害。随着大气中细颗粒物的广泛监测,PM2.5细颗粒物的日均浓度以及AQI指数越来越受到关注。
但是缺乏对PM2.5细颗粒物毒性描述的指标。
因此,本领域迫切需要开发一种大气PM2.5细颗粒物生物毒性的综合评价方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种大气PM2.5细颗粒物生物毒性的综合评价方法。
本发明第一方面提供了一种判断PM2.5细颗粒物生物毒性的方法,包括步骤:
(i)提供待测样本,所述样本为对应于PM2.5细颗粒物的空气污染的样本;
(ii)向所述待测样本中加入发光细菌培养液,从而获得发光抑制率;和
(iii)在50%±10%的发光抑制率下,测定所述样本的毒性指数,从而判断PM2.5细颗粒物的生物毒性。
在另一优选例中,所述步骤(ii)中,还包括步骤:
(a)取1/10-1/5(较佳地,1/9-1/7)滤膜的待测样本,向其中加入纯水,水浴超声离心后,从而获得上清液;
(b)向所述上清液中加入纯水和渗透压液,从而获得样品待测液;和
(c)向所述样品待测液中加入发光细菌培养液,加入前所述发光细菌培养液中的发光细菌的发光强度(原始发光强度)为I0,加入后所述发光细菌的发光强度为I1,比较I0与I1,从而获得发光抑制率。
在另一优选例中,所述待测样本的量为0.01-0.5g/膜,较佳地,0.02-0.4g/膜,更佳地,0.05-0.4g/膜。
在另一优选例中,所述步骤(a)和(b)中不含盐类物质。
在另一优选例中,所述盐类物质选自下组:氯化钠、氯化钾、或其组合。
在另一优选例中,步骤(a)中,所述纯水的体积为10-40ml,较佳地,15-25ml。
在另一优选例中,步骤(a)中,水浴温度为20-40℃。
在另一优选例中,步骤(a)中,超声时间为10min-2h,较佳地,20min-1h。
在另一优选例中,步骤(a)中,离心时间为5-30min,较佳地,10-20min。
在另一优选例中,所述步骤(b)中,所述纯水的体积为0.1-20ml,较佳地,0.5-15ml,更佳地,0.5-10ml。
在另一优选例中,所述步骤(b)中,所述渗透压液的体积为0.1-2ml,较佳地,0.2-1ml。
在另一优选例中,所述步骤(c)中,根据发光细菌的原始发光强度I0和发光强度I1,用急性毒性测试仪,用以下公式计算发光抑制率;
其中公式如下:
发光抑制率(%)=(发光细菌的原始发光强度I0-发光细菌的发光强度I1)/发光细菌的原始发光强度I0×100%。
在另一优选例中,所述发光细菌为淡水发光细菌。
在另一优选例中,所述发光细菌选自下组:青海弧菌、费氏弧菌、或其组合。
在另一优选例中,所述步骤(c)中,所述发光细菌培养液的体积为10-100μl,较佳地,20-80μl,更佳地,30-60μl。
在另一优选例中,所述步骤(iii)中,用以下公式测定所述样本的毒性指数:
T=C×D;
其中,
D是毒性当量,即毒性阳性,取测试样本质量的倒数作为毒性当量;
C为所述待测样本中PM2.5的浓度;
T为毒性指数,以所述待测样本中PM2.5的浓度C值与毒性当量D的乘积(无量纲)表示,用以反应当日大气中PM2.5的毒性情况。
在另一优选例中,所述毒性当量(D)的测试范围为0.1-1.2,较佳地,0.121-1.079。
在另一优选例中,所述毒性指数T的范围为10-150,较佳地,15.0-145.8。
应理解,在本发明范围内中,本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合,从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅,在此不再一一累述。
附图说明
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