[发明专利]用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医用敷料领域，具体涉及一种用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料及其制备方法。

背景技术

皮肤是是人体最大的器官，皮肤覆盖全身，并与外界环境接触，起着保护机体的屏障作用，它使体内各种组织和器官免受物理性、机械性、化学性和病原微生物性的侵袭，例如防止水分、电解质和血浆蛋白的丢失，抵御细菌侵入，防止毒物进入，抵挡机械性损伤，防止紫外线照射对人体的伤害等。此外，皮肤还具有感觉、分泌、排泄和体温调节等生理学功能。因此，皮肤无论是溃疡伤口还是各种烧伤、擦伤等都应尽快得到护理，使皮肤恢复组织和功能，在这方面敷料起着重要作用。

成纤维细胞作为创面修复的主要细胞，创伤后出现以活化、增殖、迁移、合成和分泌包括胶原在内的细胞外基质等为特征的生物学行为改变，并参与肉芽组织及瘢痕形成和后期创面重塑。2006年日本京都大学山中伸弥把Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4这四种转录因子引入小鼠胚胎或皮肤纤维母细胞，发现可诱导其发生转化，产生的诱导多能干细胞在形态、基因和蛋白表达、表观遗传修饰状态、细胞倍增能力、类胚体和畸形瘤生成能力、分化能力等都与胚胎干细胞极为相似。因此，以成纤维细胞为母细胞制备得到的诱导多能干细胞在医学上具有广泛的应用前景。

中国专利申请(CN201510193325.0)公开了一种具有生物活性的医用敷料及其制备方法，所述一种具有生物活性的医用敷料是将人或动物的胚胎干细胞、脐带血干细胞、羊水干细胞、外周血造血干细胞、骨髓间充质干细胞的一种或几种在体外培养，收集对数生长期分泌的干细胞生长因子与与I型胶原、III型胶原、壳聚糖、透明质酸、硫酸软骨素、海藻酸钠中的一种或几种基质按比例混合制成薄层海绵作为内层，贴合以聚乳酸(PLA)、聚羟基乙酸(PGA)、乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚己内酯(PCL)等中的一种或几种形成的混合物制成的多孔高分子材料薄膜外层，冻干裁切后组成具有生物活性的医用敷料，用于覆盖烧、烫伤、手术、创伤、疾病引起的皮肤缺损创面，诱导创面修复。

但是与诱导多能干细胞相比，上述干细胞在体外培养增殖速度慢、易衰老，不易大量获得干细胞生长因子，因而要大批量生产所述具有生物活性的医用敷料，对干细胞的消耗量巨大，生产成本高。

中国专利申请(201510700273.1)提供了一种生物敷料的制备方法及生物敷料，该生物敷料的制备方法，包括：步骤1)将人成纤维细胞接种到覆盖有胶原的尼龙网膜上，培养，获得真皮层；步骤2)将所获得的真皮层进行冷冻干燥，获得含有失活的人成纤维细胞和细胞外基质的真皮层；步骤3)在含有失活的人成纤维细胞和细胞外基质的真皮层的上表面涂覆硅胶溶液，静置、凝固，获得生物敷料。

成纤维细胞在上述覆盖有胶原的尼龙膜上培养难道大，并且长时间培养极易染菌，这不仅对生产技术人员操作提出了严格的要求，而且对生产设备的要求也更为严格。而且，敷料上培养的成纤维细胞失活后，则其主要作用的为细胞外基质中活性物质。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料，其含有干细胞提取物，抗菌肽和生物活性玻璃等主要成分。本发明敷料不仅能有效促进创伤修复，而且杀菌消毒显著；此外本发明敷料为液体敷料，方便用于皮肤各处创伤。此外，本发明还提供了用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料的制备方法。

本发明通过以下技术方案实现：

一种用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料，每100g所述敷料包括：干细胞提取物1-10g，壳聚糖季铵盐1-5g，生物活性玻璃粉体5-10g，荷荷巴油0.3-0.5g，甘油5.5-6.5g和蒸馏水65-82.2g。

优选地，每100g所述敷料由以下成分及其重量组成：干细胞提取物8g，壳聚糖季铵盐3g，生物活性玻璃粉体10g，荷荷巴油0.3g，甘油6.2g和蒸馏水68g。

优选地，所述干细胞提取物为诱导多能干细胞提取物。所述IPS细胞提取物的制备方法为：

S1.诱导多能干细胞的培养：Matrigel基质胶4℃过夜溶解后，用DMEM/F12按体积比1∶100的比例稀释Matrigel基质胶，混匀后加入培养皿中包被30min后弃去培养液，接种诱导多能干细胞，并于37℃的CO₂培养箱中培养；