[发明专利]用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料及其制备方法

权利要求书

1.一种用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料，其特征在于，每100g所述敷料包括：干细胞提取物1-10g，壳聚糖季铵盐1-5g，生物活性玻璃粉体5-10g，荷荷巴油0.3-0.5g，甘油5.5-6.5g和蒸馏水65-82.2g。

2.根据权利1所述用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料，其特征在于，每100g所述敷料由以下成分及其重量组成：干细胞提取物8g，壳聚糖季铵盐4g，生物活性玻璃粉体10g，荷荷巴油0.3g，甘油6.2g和蒸馏水68g。

3.根据权利要求1或2所述用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料，其特征在于，所述干细胞提取物为诱导多能干细胞提取物；所述IPS细胞提取物的制备方法为：

S1.诱导多能干细胞的培养：Matrigel基质胶4℃过夜溶解后，用DMEM/F12按体积比1:100的比例稀释Matrigel基质胶，混匀后加入培养皿中包被30min后弃去培养液，接种诱导多能干细胞，并于37℃的CO₂培养箱中培养；

S2.细胞提取物提取：吸出S3培养瓶中培养液，用PBS清洗2～3次，在4℃以下，匀浆3-5次；将匀浆液置于冰箱冻存至完全冻结，然后在不高于隔水42℃的条件下彻底融化，然后收集到离心管中，离心取上清；取上清液置于透析袋中，以4℃PBS溶液透析8小时；将透析袋内溶液冷冻干燥，保存在-80℃冰箱。

4.根据权利要求1或2所述用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料，其特征在于，所述生物活性玻璃由58S生物活性玻璃与45S生物活性玻璃按质量比2:3混合而成；其中58S生物活性玻璃粉体粒径＜20μm，45S生物活性玻璃粉体粒径＜40μm。

5.根据权利要求1或2所述用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料，其特征在于，所述壳聚糖季铵盐由壳聚糖和2,3-环氧丙基三甲基氯化铵合成的，取代度为4％～6％。

6.根据权利要求1-5任一所述用于创伤修复含有干细胞提取物的敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)干细胞提取物冻干粉的制备；

(2)准确称取相应重量的荷荷巴油和甘油，二者混合后搅拌10-15min后，加入生物活性玻璃粉体，继续搅拌至均匀，制备得到A液；

(3)将壳聚糖季铵盐溶于蒸馏水中，加入到A液中，混匀后加热至85℃，持续加热5min后，搅拌均匀，得B液；

(4)待B液冷却至35-40℃时，加入干细胞提取物冻干粉，搅拌均匀，即得。