[发明专利]包含内部标记引物的核酸的测序、扩增和检测方法在审
| 申请号： | 201710523381.5 | 申请日： | 2012-05-04 |
| 公开（公告）号： | CN107190078A | 公开（公告）日： | 2017-09-22 |
| 发明（设计）人： | 弗兰切斯卡·迪帕斯奎尔;丹尼尔·米勒 | 申请（专利权）人： | 凯杰有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 中原信达知识产权代理有限责任公司11219 | 代理人： | 杨青,穆德骏 |
| 地址： | 德国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 包含 内部 标记 引物 核酸 扩增 检测 方法 | ||
1.内部标记的核酸引物在减少染料污迹中的应用，其中所述核酸引物用于包括下列步骤的扩增方法：
i)提供至少一种核酸引物，其包含至少一个标记的核苷酸，
ii)提供没有外切酶活性的DNA聚合酶和试剂，使用所述至少一种标记的核酸引物来扩增靶核酸，
iii)将反应组分在适合于靶核酸引物扩增的条件下温育，
iv)通过标记的核苷酸来检测扩增的核酸，
其中所述核酸引物包含下列序列：
5’-NaXNb-3’，
其中N可以是任意核苷酸，
其中“a”和“b”表示核苷酸的数量并且可以在1至150的范围内，其中“a”和“b”相差5或更小，并且其中X是所述至少一个标记的核苷酸。
2.内部标记的核酸引物在减少扩增方法中出现的染料污迹中的应用，所述扩增方法包括下列步骤：
i)提供至少一种核酸引物，其包含至少一个标记的核苷酸，
ii)提供酶和试剂，使用所述至少一种标记的核酸引物来扩增靶核酸，
iii)将反应组分在适合于靶核酸引物扩增的条件下温育，
iv)通过标记的核苷酸来检测扩增的核酸，
其中所述核酸引物包含下列序列：
5’-NaXNb-3’，
其中N可以是任意核苷酸，
其中“a”和“b”表示核苷酸的数量并且可以在1至150的范围内，其中“a”和“b”相差5或更小，并且其中X是所述至少一个标记的核苷酸。
3.权利要求1或2的应用，其中步骤iv)包括按照大小分离所述扩增的核酸的步骤。
4.权利要求1或2的应用，其中标记物通过核苷酸的环外氨基或2'-氨基连接到所述核苷酸。
5.权利要求1或2的应用，其中“a”在3至25之间。
6.权利要求1或2的应用，其中“b”在3至25之间。
7.权利要求1或2的应用，其中“a”和“b”具有相同的值和/或为10。
8.权利要求1或2的应用，其中所述核酸引物具有10至300nt的长度。
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