[发明专利]一种检测血清中异常脱羧凝血酶原的蛋白芯片、试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种检测血清异常脱羧凝血酶原的高通量蛋白芯片，其特征在于：

所述蛋白芯片的基质载片上设置有多个检测亚区，每个所述检测亚区用于检测一份血清样品；所述每个所检测亚区内设置有检测斑区域和对照斑区域，所述检测斑区域有通过喷涂微量DCP特异性抗体形成的检测斑，所述对照斑区域有通过喷涂牛血清白蛋白形成的对照斑；同一个检测斑区域内的所有检测斑上的物质的浓度相同；

形成每一个所述检测斑的DCP特异性抗体的总量为3-5nL,浓度为3-5mg/ml，每个检测斑通过非接触式点样仪分6-10次，每次喷涂300-500pL的方式形成，检测斑直径为0.5-1mm。

2.根据权利要求1所述的蛋白芯片，其特征在于，每个所述检测斑区域包括排列成1排的4-8个相互分隔的检测斑，所述对照斑区域包括排列成1排的4-8个相互独立分隔的对照斑；所述检测斑和对照斑排成平行的两列。

3.根据权利要求2所述的蛋白芯片，其特征在于，芯片的长、宽、厚度为76.4mm、25.2mm、1mm，所述基质载片上设置10个所述检测亚区。

4.根据权利要求2所述的蛋白芯片，其特征在于，所述检测亚区之间设置有凸起作为物理隔断。

5.根据权利要求1所述的蛋白芯片，其特征在于，所述DCP的特异性抗体为鼠抗人DCP。

6.权利要求1-5任一所述用于检测异常脱羧凝血酶原的蛋白芯片的制备方法，其特征在于：

用于形成每一个所述检测斑的DCP特异性抗体的总量为3nl,浓度为4mg/ml，所述DCP特异性抗体分6-10次喷涂且每次喷涂300-500pl形成一个所述检测斑。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，喷涂过程中，所述DCP特异性抗体的温度为4-8摄氏度。

8.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于，采用非接触式点样仪进行喷涂点样。

9.一种检测血清异常脱羧凝血酶原的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1-5任一所述的蛋白芯片，以及HRP标记的凝血酶原多克隆抗体，HRP化学发光底物液；所述HRP标记的凝血酶原多克隆抗体为兔源抗体，与所述检测斑上固定的DCP特异性抗体来源于不同物种。

10.一种检测血清异常脱羧凝血酶原的方法，其特征在于：采用权利要求1-6任一所述的蛋白芯片，包括如下步骤：

将待测血清样本稀释后滴加在所述蛋白芯片的检测亚区上，孵育后，用PBST洗涤检测亚区，去除非特异结合物；

加入用PBS稀释的HRP标记的凝血酶原抗体,孵育后，用PBST洗涤，去除非特异结合物；

加入HRP底物发光液，用化学发光扫描仪对蛋白芯片进行扫描，分别得到稀释后待测血清样本中的DCP发光像素值；

所述孵育指37℃孵育30分钟。