[发明专利]一种天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法，其特征在于，按照如下步骤进行：

1)筛选出能产生三醇类人参皂苷水解酶的好氧型单一菌株；

2)以人参属植物的植株组织为主要原料，并添加麦麸、麦草、谷物粉、稻壳中的至少一种，以及水和其他诱导物，充分搅拌、混匀后，迅速加热至100℃以上，并保持2～30分钟进行灭菌，然后迅速冷却至45℃以下；

3)灭菌后，接入菌株，通过转动发酵罐充分搅拌培养基，并通入无菌空气；先保温培养10～36h，待微生物繁殖产热后，再降温继续培养；发酵过程中，培养基根据菌株特性维持在最适温度范围内，即26～30℃；动态发酵培养3～15天后，发酵产物即为富含F1的高活性参制品；

4)上步获得的富含F1的参制品，可以直接包装为具有抗衰老活性的参制品，也可以加入低级醇提取人参皂苷混合物；此混合物可直接用来分离制备F1，也可用于制备低糖基三醇类人参次苷群；

5)提取过后的滤渣，用水或缓冲液提取水解酶；

6)利用第5步提取的水解酶对第4步提取的人参皂苷进行转化，可得F1、20-(R,S)Rg2、Rg4、Rg6、20-(R,S)Rh1、Rk3、Rh4、三醇类稀有皂苷群的混合物，即为天然来源的高活性抗衰老成分。

2.如权利要求1所述的天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法，其特征在于，所述的人参属植物的植株组织，包括人参、西洋参、三七参、竹节参、珠子参的根、茎、叶、种子、花、果实；所述的诱导物为人参属植物的植株组织或其提取物，或槐花、豆粕、淫羊藿、芦丁、黄芩中的至少一种。

3.如权利要求1所述的天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法，其特征在于，除水外，人参属植物的植株组织、麦麸、麦草、谷物粉的总添加量占比为60％以上，诱导物的占比为40％以下。

4.如权利要求1所述的天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法，其特征在于，所述的无菌空气由空压机产生，并经过空气过滤器除菌获得。

5.如权利要求1所述的天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法，其特征在于，所述的水提取水解酶的过程如下：向用低级醇提取皂苷后的发酵产物中加入2～6倍水，在40～75℃提取人参皂苷水解酶2次，得到人参皂苷水解酶提取液；提取液在40～60℃，-0.01Mpa～-1Mpa下减压浓缩至50Brix以上，得到活性人参水解酶A。

6.如权利要求1所述的天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法，其特征在于，所述的缓冲液提取水解酶的过程如下：用2～6倍的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液或磷酸盐缓冲液或乙酸-乙酸钠缓冲液进行提酶，缓冲液的pH值为4.2～6.8,浓度为0.005～0.1M；混合充分，浸泡10分钟以上，经过滤型离心机离心除杂，所得到的澄清液即为粗酶液；粗酶液用硫酸铵或酒精浸泡后，再用澄清型离心机收集沉淀酶蛋白，即得固态型活性人参水解酶B。

7.根据权利要求1所述的天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法，其特征在于，酶转化过程中可以适量加入有机酸调节酸度。

8.如权利要求1所述的天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法，其特征在于产物还可以利用萃取法、大孔吸附树脂、硅胶柱、结晶法、制备型液相色谱等方法，进一步分离、纯化，得到高纯度的单体皂苷。

9.如权利要求1-8任意一种的天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法，其制备的高活性抗衰老成分，具有延缓衰老的功效，可以添加到食品、保健品或药品中。

10.如权利要求1-8任意一种的天然来源的高活性抗衰老成分的制备方法，其制备的高活性抗衰老成分中，人参皂苷F1具有抗紫外线、抑制皮肤络氨酸酶活性、抑制黑色素形成的功效；人参皂苷Rh1能够清除自由基、增强过氧化歧化酶活性的功效，该高活性抗衰老成分可以添加到化妆品中，制备具有美白、抗衰老功效的化妆品。