[发明专利]一种生物标记物、采样方法、建模方法及其用途

说明书

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及生物标志物、采样方法、建模方法及其用途。

背景技术

肺癌是目前中国发病率最高的恶性肿瘤之一，其死亡率也居高不下。据中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所陈万青等发表在国际权威医学期刊杂志《CA-Cancer JClin》的《2015年中国癌症统计》，2015年中国约有429.2万癌症新发病例，281.4万癌症死亡病例。其中，肺癌以新发病例73.3万例(占整体17.1％)、死亡病例61万例(占整体21.1％)，成为中国人罹癌或因癌致死的最大威胁。

在临床实践中，肺癌早期诊断一直是难点，癌症的早期发现对癌症患者的有效治疗是非常重要的。肺癌生存率高度依赖于诊断发现的阶段，早期诊断从而可以早期治疗，将可大大提高5年生存率。目前对于癌症的诊断主要依据临床症状、影像学检测和组织病理学检查等，但有许多癌症的临床症状出现较晚，并且活体取样检测也困难，严重影响了癌症的早期诊断和病人的预后。相对于组织活检，血浆、痰液、肺泡灌洗液等标本容易获得，且对病人也没有创伤。目前，在外周循环血中，特定蛋白的表达异常、特定基因异常DNA甲基化、某些miRNA异常表达等等都可能是由癌症导致的。因此对这些特殊因素的分析和检测也为肺癌的早期诊断提供了帮助。

外周血是机体绝大多数蛋白、因子等的终末汇集处，机体的任何一种损伤或者应激都有可能导致许多蛋白、因子表达不稳定，因此单一检测外周血中某一种因子对肺癌的诊断的灵敏度和特异性均差强人意。目前临床上以大分子癌症标记物的单一或联合使用作为癌症诊断手段的研究较多，而对小分子类癌症标记物缺乏系统深入的探讨。

SFTPB(surfactant protein B)的前体pro-SFTPB,是由2型肺泡壁细胞和非纤毛细支气管细胞合成一个亲水性的42kD蛋白。合成过程中，pro-SFTPB在内质网中迅速被半胱氨酸蛋白酶溶蛋白性裂解，得到一个分泌型的9kD非胶原区疏水性SFTPB，这是SFTPB的成熟有功能的形式。肺癌细胞，尤其是肺腺癌，通常伴有SFTPB合成调节异常，前体转变为有成熟的疏水形式蛋白的过程减缓，导致pro-SFTPB的过表达。研究证实在非小细胞肺癌患者中检测到循环成熟的SFTPB水平高于正常人。SFTPB、Pro-SFTPB可以作为检测非小细胞肺癌的诊断靶标。

代谢组学是系统生物学中的一个重要组成部分，研究对象是机体内的终端小分子代谢物(通常指分子量小于1000Da)的变化规律的科学。其从整体上对某一生物体组分或细胞在一特定生理时期或条件下所有代谢产物同时进行定性和定量分析，仪寻找出目标差异代谢物。可用于疾病早期诊断、药物靶点发现、疾病机理研究及疾病诊断等。代谢组学分析的样本主要是尿液和血液，其采集过程对人体无伤害。多胺类化合物是小的阳离子分子，通常认为是与正常细胞和癌细胞调节关键代谢酶相关。多胺类小分子包括1,3-丙二胺、腐胺、尸胺、精胺、酰化精胺、精脒、酰化精脒等。在正常的哺乳动物细胞内这类小分子物质是必不可少的，且其含量由一系列复杂的网络调控，包括合成、降解、和运输。在上皮性肿瘤中多胺类化合物也收原癌基因和肿瘤抑制基因的调节。目前尚未能有充分证据证实何种多胺为癌症的生物标记物，也无肺癌特异性标记物，这大大影响了肺癌辅助诊断、预后和疗效评估指标等。

目前尚未能有充分证据证实SFTPB、pro-SFTPB和N¹，N¹²-二乙酰精胺在癌症预测中的意义，仅有单个生物标记物对癌症检测的研究，而其灵敏度和特异性都不高。本发明的这个组合结合了生物标记物的特性，优化组合，从而为癌症预测提供了帮助。

目前仅有对SFTPB、pro-SFTPB和N1，N12-二乙酰精胺其中某一种生物标记物进行检测的研究，各指标的检测手法单一，不能满足多种样本类型的需求，且其结果对癌症的预测的灵敏度和特异性均不佳。

发明内容

本发明的目的在于解决现有肺癌诊断标记物单一，灵敏度和特异性均不佳的现状，提供新型生物标记物、采样方法、建模方法及其用途。

一种生物标记物，所述标记物为SFTPB(surfactant protein B，表面蛋白B)、pro-SFTPB(pro-surfactant protein B，表面蛋白B前体)、N¹，N¹²-二乙酰精胺(N¹，N¹²-diacetylspermine)的任一种或其组合。