[发明专利]一种从野马追中提取的抗癌组合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于天然药物活性组分技术领域，涉及从中药中提取、制备有效组分及其应用的领域，尤其是涉及一种菊科泽兰属中药野马追中三个倍半萜内酯天然组合物的制备方法及其在乳腺癌治疗中的应用。

背景技术

菊科(Compositae)泽兰属(Eupatorium L.)植物全世界约有600余种，主要分布于中南美洲的温带及热带地区。我国有14个种，若干个变种，除新疆、西藏外全国均产。泽兰属作为药用的植物，目前应用较多的有林泽兰、华泽兰等八个种。该属植物具有悠久的用药历史。

野马追为菊科泽兰属植物林泽兰(Eupatorium lindleyanum DC.)的干燥地上部分，在我国分布较广，具有多年用药历史，现被我国2015版药典收载。野马追，味苦、性平，归肺经，具有清热解毒，化痰止咳、平喘等功效，可用于劳伤咳嗽、吐血咳血以及淋浊白带、无名肿痛等治疗。

野马追已被开发成颗粒剂、糖浆剂等多种中成药应用于临床。野马追糖浆是名优中成药，主要用于呼吸系统疾病，如咳嗽等治疗，产生了显著的社会及经济效益。

野马追含有黄酮、倍半萜内酯等化学成分。黄酮类成分与其呼吸系统生物活性相关，2015版药典以金丝桃苷为其指标性活性成分。野马追倍半萜内酯类成分亦为野马追重要生理活性成分。迄今为止，虽然文献报道，对野马追进行了较系统的化学成分研究，已从野马追中提取、分离得到了一系列新颖倍半萜内酯类化合物，并且鉴定了其化学结构；文献亦报道多个倍半萜内酯类化合物单体体外具有抗肿瘤活性。但迄今未有对野马追中含有的特定倍半萜内酯类成分组合物的研究报道，亦没有提供一种工艺科学合理，组合物性能稳定、药效物质明确、纯度高、生物活性强的野马追倍半萜内酯组合物的制备方法，及其在临床发病率高的乳腺癌治疗方面的应用。

目前，在提取溶剂及提取方法方面，文献“野马追地上部分的化学成分研究(Ⅱ)”(杨念云；中国天然药物；2005年第3卷)；文献“Six New Sesquiterpenes from Eupatorium lindleyanum”(Shuang-Qing Wu；2012年第95卷)均公开了野马追中倍半萜内酯类成分的提取方法，两个研究均用80％的乙醇加热回流提取。80％的乙醇在提取野马追倍半萜内酯类成分方面具有优势，但该提取溶剂亦能引入较多非倍半萜内酯类杂质，对后续的分离、纯化造成一定的影响；加热回流提取亦可能造成热敏性倍半萜内酯类成分的降解；加热提取亦有较大的能耗。

在萃取溶剂方面，文献“Cytotoxic sesquiterpene lactones from Eupatorium lindleyanum”(N.-Y.Yang；Journal of Asian Natural Products Research；2007年第9卷)公开了野马追倍半萜内酯的提取、纯化方法。该方法在纯化倍半萜内酯粗提物时，用氯仿对野马追95％乙醇提取物进行萃取，氯仿的极性在萃取倍半萜内酯类成分方面具有一定优势，但氯仿有一定肝毒性，作为工业生产不符合绿色、环保等理念，存在一定的技术缺陷。

文献“Cytotoxic Sesquiterpene Lactones from Eupatorium lindleyanum”(Jun Huo；Journal of Natural Products；2004年第64卷)公开了野马追中倍半萜内酯类成分的提取、纯化方法，该方法未对95％的野马追乙醇提取物进行萃取，乙醇提取物直接进行硅胶柱层析分离，会引入大量非倍半萜内酯类杂质，且影响硅胶柱层析的分离效能。

在纯化方法方面，“Preparative Isolation and Purification of Three Sesquiterpenoid Lactones from Eupatorium lindleyanum DC.by High-Speed Counter-Current Chromatography”(Guilong Yan；Molecules；2012年第17卷)公开了三个倍半萜内酯类成分的分离、纯化方法，该方法主要利用高速逆流色谱法分离、纯化倍半萜内酯类单体。高速逆流色谱法具有绿色、环保等特点，配合HPLC分析，在确定两相溶剂基础上，能高效分离到高纯度单体，但迄今未有利用高速逆流色谱用于分离、纯化野马追倍半萜内酯组合物的研究报道。