[发明专利]一种可大幅提高包涵体蛋白复性效率的高分子复合胶束及其复性工艺

权利要求书

1.一种可大幅提高包涵体蛋白复性效率的高分子复合胶束，其特征在于：由粒径为30-500nm且均匀分布的颗粒构成，所述高分子复合胶束由两种双亲性嵌段共聚物组成，两种双亲性嵌段共聚物中包括一种亲水端具有环境响应性的双亲性嵌段共聚物和一种亲水端不带环境响应性的双亲性嵌段共聚物，该复合胶束在一定条件下为核-壳结构，核层和壳层分别由两种双亲性嵌段共聚物的疏水端和亲水端混合组成。

2.根据权利要求1所述可大幅提高包涵体蛋白复性效率的高分子复合胶束，其特征在于：所述两种双亲性嵌段共聚物的疏水端为5-20kDa(千道尔顿)，且两种疏水端的分子量相差不超过10kDa。

3.根据权利要求1所述可大幅提高包涵体蛋白复性效率的高分子复合胶束，其特征在于：所述亲水端具有环境响应性的双亲性嵌段共聚物，其亲水环境响应性链段为具有温度响应性的聚N-异丙基丙烯酰胺(poly(N-isopropylacrylamide),PNIPAM)、聚2-甲基-2-丙烯酸-2-(2-甲氧基乙氧基)乙酯(poly(2-(2-methoxyethoxy)ethyl methacrylate),PMEO₂MA)，或者具有pH响应性的聚β氨酯(poly(β-amino ester),PAE)，或者具有温度和pH双重响应性的聚甲基丙烯酸N,N-二甲氨基乙酯(poly(2-(Dimethylamino)ethyl methacrylate),PDMAEMA)、聚N-2-乙氨基乙基丙烯酰胺(poly(N-[2-(Diethylamino)ethyl]acrylamide),PDEAEAM)；其疏水链段为聚已内酯(poly(ε-caprolactone),PCL)、聚乳酸(polylactide,PLA)或者聚苯乙烯(polystyrene,PS)。

4.根据权利要求1所述可大幅提高包涵体蛋白复性效率的高分子复合胶束，其特征在于：针对带正电荷的包涵体蛋白(等电点pI>7.0)的复性，所述亲水端具有环境响应性的双亲性嵌段共聚物，其亲水环境响应性链段混聚了疏水类单体：包括但不限于N-叔丁基丙烯酰胺(N-tert-butylacrylamide)、N-苯基丙烯酰胺(N-phenylacrylamide)；和带正电荷类的单体：如带氨基类(-NH₂)单体、带叔胺类单体(-NR₁R₂，R₁、R₂可相同也可不同)、带季铵盐类单体(-N⁺R₁R₂R₃)、带胍基类单体、带咪唑基类单体。针对带负电荷的包涵体蛋白(等电点pI<7.0)的复性，所述亲水端具有环境响应性的双亲性嵌段共聚物，其亲水环境响应性链段混聚了疏水性单体：包括但不限于N-叔丁基丙烯酰胺(N-tert-butylacrylamide)、N-苯基丙烯酰胺(N-phenylacrylamide)；和带负电荷的单体：如带羧基(-COOH)类单体、带磷酸基团类单体、带磺酸基类单体。

5.根据权利要求1所述可大幅提高包涵体蛋白复性效率的高分子复合胶束，其特征在于：所述亲水端不具有环境响应性的双亲性嵌段共聚物，其亲水链段为聚乙二醇(poly(ethylene glycol),PEG)、聚2一甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱(poly(2-methacryloyl-oxyethyl phosphorylcholine),PMPC)，其疏水链段为聚已内酯(poly(ε-caprolactone),PCL)、聚乳酸(polylactide,PLA)或者聚苯乙烯(polystyrene,PS)。