[发明专利]一种腺苷脱氨酶活性测定方法及腺苷脱氨酶检测试剂盒在审
申请号: | 201710489359.3 | 申请日: | 2017-06-24 |
公开(公告)号: | CN109112179A | 公开(公告)日: | 2019-01-01 |
发明(设计)人: | 李丰盛;陈壮永 | 申请(专利权)人: | 浙江亚培生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34;C12Q1/32;C12Q1/48 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 312500 浙江省新昌省级高新*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 腺苷脱氨酶活性 还原型辅酶 腺苷脱氨酶 检测试剂 黄嘌呤脱氢酶 试剂稳定性 氧化型辅酶 嘌呤核苷酸 底物转化 磷酸化酶 医学检验 准确度 工具酶 灵敏度 酶反应 生成量 波长 底物 脱氢 腺苷 还原 检测 | ||
1.一种测定腺苷脱氨酶活性的方法,步骤如下:
1)、将样品与主要由腺苷、磷酸盐、嘌呤核苷磷酸化酶、氧化型辅酶、黄嘌呤脱氢酶组成的试剂混合,使之发生如下反应:
2)、检测最终反应物在主波长340nm吸光度上升的速度,测算出腺苷脱氨酶的活性大小。
2.根据权利要求1所述测定腺苷脱氨酶活性的方法,其特征在于:被测样品与试剂的比例控制在1/10到1/100。
3.一种腺苷脱氨酶检测试剂盒,包括试剂一和试剂二,其特征在于:
试剂一包括
试剂二包括
4.根据权利要求3所述腺苷脱氨酶检测试剂盒,其特征在于:所述试剂一与试剂二的比为1/1到5/1。
5.根据权利要求3所述腺苷脱氨酶检测试剂盒,其特征在于:试剂一和试剂二中所述缓冲液为三羟甲基氨基甲烷、2-码啉乙磺酸、3-(N-吗啉基)--2-羟基丙磺酸、哌嗪-1,4-二乙磺酸、3-环已胺基丙磺酸、三羟甲基氨基甲烷乙酸盐、N,N-二羟乙基甘氨酸、3-环已胺基-2-羟基丙磺酸、3-吗啉丙磺酸、三羟甲基甲胺基丙磺酸、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、二(2—羟乙基)亚胺基三(羟甲基)甲烷、酒石酸、咪唑、磷酸盐或醋酸盐中的一种,所述缓冲液的含量为50~80mmol/L。
6.根据权利要求5所述腺苷脱氨酶检测试剂盒,其特征在于:试剂一中所述缓冲剂的pH范围为6.0~11.0,试剂二中所述缓冲剂pH范围为3.0~8.0。
7.根据权利要求3所述腺苷脱氨酶检测试剂盒,其特征在于:所述防腐剂为叠氮化钠、ProClin-300、酚羟基化合物或苯甲酸化合物中的一种。
8.根据权利要求3所述腺苷脱氨酶检测试剂盒,其特征在于:所述稳定剂为小牛血清蛋白、氨基酸、糖类衍生物、多元醇中的至少一种。
9.根据权利要求3所述腺苷脱氨酶检测试剂盒,其特征在于:所述表面活性剂为吐温类或聚氧乙烯醚类非离子表面活性剂,所述吐温类非离子表面活性剂的用量范围为1~2ml/L。
10.根据权利要求3所述腺苷脱氨酶检测试剂盒,其特征在于:所述显色剂为氧化型辅酶Ⅰ或氧化型辅酶Ⅱ,所述显色剂的含量为0.5~3.0g/L。
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