[发明专利]一种唾液样本中痕量大麻的检测方法及使用的SPR芯片

权利要求书

1.一种唾液样本中痕量大麻的检测方法，所述检测方法为利用SPR芯片在SPR仪上检测待测样本中的THC含量，其特征在于，所述SPR芯片为抗THC抗体SPR芯片，所述抗THC抗体SPR芯片通过以下方法制得：

S1、将THC分别偶联于KLH和OVA，得到THC-KLH和THC-OVA；

S2、用上述THC-KLH和快速免疫佐剂免疫BALB/C小鼠，用THC-OVA检测免疫小鼠抗THC的抗血清效价；

S3、取抗血清ELISA效价在6K以上的小鼠，取脾脏的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合，经单克隆筛选获得抗血清ELISA效价在10K以上的抗THC抗体杂交瘤细胞株；

S4、将上述杂交瘤细胞株接种至BALB/C小鼠腹腔，从腹水中制备纯化抗体；

S5、用本瓜蛋白酶将上述纯化抗体水解成Fc段和Fab段，将Fab段包被于3D环氧SPR芯片，获得抗THC抗体SPR芯片。

2.根据权利要求1所述的一种唾液样本中痕量大麻的检测方法，其特征在于，步骤S2中所述的快速免疫佐剂为QuickAntibody-Mouse5W。

3.根据权利要求1所述的一种唾液样本中痕量大麻的检测方法，其特征在于，步骤S2中所述的THC-OVA检测在THC-KLH和快速免疫佐剂免疫BALB/C小鼠5周后进行。

4.根据权利要求1所述的一种唾液样本中痕量大麻的检测方法，其特征在于，步骤S3中所述的抗THC抗体杂交瘤细胞株的灵敏度为0.3-3ng。

5.根据权利要求1所述的一种唾液样本中痕量大麻的检测方法，其特征在于，步骤S4中所述的从腹水中制备纯化抗体的具体过程为：从腹水中获取抗体，然后用Protein G柱吸附纯化得到纯化抗体。

6.一种如权利要求1-5任一所述的唾液样本中痕量大麻的检测方法中使用的SPR芯片，其特征在于，所述的SPR芯片为抗THC抗体SPR芯片，所述抗THC抗体SPR芯片通过以下方法制得：

S1、将THC分别偶联于KLH和OVA，得到THC-KLH和THC-OVA；

S2、用上述THC-KLH和快速免疫佐剂免疫BALB/C小鼠，用THC-OVA检测免疫小鼠抗THC的抗血清效价；

S3、取抗血清ELISA效价在6K以上的小鼠，取脾脏的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合，经单克隆筛选获得抗血清ELISA效价在10K以上的抗THC抗体杂交瘤细胞株；

S4、将上述杂交瘤细胞株接种至BALB/C小鼠腹腔，从腹水中制备纯化抗体；

S5、用本瓜蛋白酶将上述纯化抗体水解成Fc段和Fab段，将Fab段包被于3D环氧SPR芯片，获得抗THC抗体SPR芯片。

7.根据权利要求6所述的一种唾液样本中痕量大麻的检测方法中使用的SPR芯片，其特征在于，步骤S2中所述的快速免疫佐剂为QuickAntibody-Mouse5W。

8.根据权利要求6所述的一种唾液样本中痕量大麻的检测方法中使用的SPR芯片，其特征在于，步骤S2中所述的THC-OVA检测在THC-KLH和快速免疫佐剂免疫BALB/C小鼠5周后进行。

9.根据权利要求6所述的一种唾液样本中痕量大麻的检测方法中使用的SPR芯片，其特征在于，步骤S3中所述的抗THC抗体杂交瘤细胞株的灵敏度为0.3-3ng。

10.根据权利要求6所述的一种唾液样本中痕量大麻的检测方法中使用的SPR芯片，其特征在于，步骤S4中所述的从腹水中制备纯化抗体的具体过程为：从腹水中获取抗体，然后用Protein G柱吸附纯化得到纯化抗体。