[发明专利]用于基因分型检测α+缺失型地中海贫血的引物组及试剂盒

说明书

本发明提供一种用于基因分型检测α⁺缺失型地中海贫血的引物组及试剂盒，属于分子生物学领域。所述引物组包括如下引物对：上下游引物序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的3.7F/3.7R；上下游引物序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3所示的DPAIC‑F/DPAIC‑R；上下游引物序列分别如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的4.2F/4.2R。采用本发明的引物组和试剂盒检测α⁺缺失型地中海贫血，结果准确、直观，具有较高的特异性，成本低、易于推广。

技术领域

本发明属于分子生物学医药领域，具体涉及一种用于基因分型检测α⁺缺失型地中海贫血的引物组及试剂盒。

背景技术

地中海贫血是(简称地贫)是世界上最常见的血液系统遗传病之一，呈现常染色体隐性遗传规律。主要分为α地中海贫血(α-地贫)和β地中海贫血(β-地贫)两类，分别由于α-珠蛋白基因或β-珠蛋白基因缺失、突变等缺陷引起对应的珠蛋白链的合成受到抑制或其功能丧失所致。该病高发于从地中海沿岸的意大利、希腊、马耳他、塞浦路斯到东南亚各国的广大地区。我国南方也是本病的高发地区，在广西、广东，α-地贫基因的人群携带率分别高达17.55％.8.53％。由于α-地贫具有普遍性、人口基数大、涉及范围广等特点，包括我国南方在内的重症地中海贫血患儿的出生是世界公认的公共健康卫生问题。

正常情况下，人类珠蛋白基因所表达的α和β珠蛋白链之间保持适当比例(1:1)，形成具有功能的血红蛋白四聚体，极少或没有剩余的α-链或β-链。当珠蛋白基因在体内发生缺失、突变等基因缺陷时，致使血红蛋白四聚体中的珠蛋白肽链一种或几种合成缺乏或减少，而引起体内血红蛋白α-链与β-链比例失衡，进而导致血红蛋白不稳定，冗余的珠蛋白链沉积在红细胞膜上，红细胞膜的通透性和脆性发生改变，导致溶血性贫血，临床上表现出症状轻重不一的慢性进行性溶血性贫血。临床上，将α链合成减少而β链相对过剩则归类为α-地贫。

根据分子缺陷可将其分为:几个核苷酸的插入与缺失或单个碱基替换的非缺失型α-地贫和大片段基因的缺失型α-地贫两大类。而就一个单倍体而言，根据α-珠蛋白合成减少的程度，α-地贫可为两类缺陷:α⁰地中海贫血(α-地中海贫血1)，特点为α-珠蛋白肤链合成完全受阻，缺失两个α基因(__/αα)；α⁰地贫基因具有明显的地理分布与种族特征，我国最常见的为--^SEA，少见--^THAI，而--^FIL则更罕见；②α⁺地中海贫血(α地中海贫2)，表现为α-珠蛋白肤链合成部分受阻，通常缺失一个α基因或一个α基因发生点突变或少数几个碱基的缺失或插入引起(-α/，α^Tα)，我国最常见的α⁺地贫基因为-α^3.7、-α^4.2缺失型突变以及Hb WS,Hb QS与Hb CS等点突变。

α-地贫是典型的基因缺失型遗传病，研究资料表明95％以上的α-地贫是由于α-珠蛋白基因大片断缺失(缺失型)所致,其缺失数目是α-地中海贫血临床表现及分型的依据。根据临床表现又将其分为静止型(-α/αα,α^Tα/αα)、标准型(--/αα,-α/-α,α^Tα/α^Tα,-α/α^Tα)、血红蛋白H病(--/α^Tα、--/-α)与Hb Bart's水肿胎儿综合征(--/--)四类。其中临床症状最重的为Hb Bart's水肿胎儿综合征，患儿通常不能存活；其次为血红蛋白H病(HbH)，其临床表现往往轻重不一，通常非缺失型HbH病人的临床表现往往比缺失型HbH病人更为严重。目前该病尚无理想的治疗方法，研究表明在地贫高发区，对夫妇双方均为地贫基因携带者的孕妇在妊娠早期筛查或中期应用相应分析技术通过遗传筛查和产前基因诊断选择性地淘汰重症α-地贫胎儿则是控制该病发生的首要途径和有效预防措施。因此，对于α⁺地贫的检测急需一种简单、能快速准确基因分型的技术手段。