[发明专利]测定样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇的方法及试剂有效
申请号: | 201710485900.3 | 申请日: | 2017-06-23 |
公开(公告)号: | CN107446989B | 公开(公告)日: | 2020-07-14 |
发明(设计)人: | 邹炳德;邹继华;汪屹;贾江花;徐炜烽;俞凤 | 申请(专利权)人: | 美康生物科技股份有限公司;宁波美康盛德医学检验所有限公司 |
主分类号: | C12Q1/60 | 分类号: | C12Q1/60;C12Q1/44;C12Q1/26;C12Q1/28 |
代理公司: | 宁波甬致专利代理有限公司 33228 | 代理人: | 沈春红 |
地址: | 315104 浙江省宁*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 测定 样本 中的 密度 脂蛋白 胆固醇 方法 试剂 | ||
1.一种测定样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇的方法,其特征在于:
(1)在胆固醇酯酶和离子选择剂的存在下,先消除样本中除sdLDL-C以外的脂蛋白中的胆固醇;所述的步骤(1)中还添加了胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4氨基安替比林和EmulgenB66;其中胆固醇氧化酶含量为0.1-50KU/L;其中过氧化物酶含量为0.1-10KU/L;其中4氨基安替比林含量为0.05-10mM;其中Eugene B66的含量为0.01%-5%;
(2)定量检测步骤(1)处理后剩余的sdLDL-C;所述的步骤(2)中还添加了作用于sdLDL-C的表面活性剂曲拉通X-100;
所述的离子选择剂选自以下类型的物质:1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、1-正己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑甲磺酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑三氟甲烷磺酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑甲基硫酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑硝酸盐、1-丁基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐、1-丁基-4-甲基吡啶四氟硼酸盐、1-辛基-4-甲基吡啶四氟硼酸盐、1-丁基-1甲基吡咯烷溴盐、三己基十四烷基六氟磷酸磷、四丁基甲磺酸铵、三乙基硫双(三氟甲基磺酰)亚胺、1-乙基-3-甲基咪唑甲磺酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑十二烷基磺酸盐、聚赖氨酸聚乙二醇共聚物。
2.根据权利要求1所述的测定样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇的方法,其特征在于:所述的步骤(1)中还添加了牛血清白蛋白、磷脂酶D或抗维生素C氧化酶中的一种或者多种的混合。
3.根据权利要求1所述的测定样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇的方法,其特征在于:所述的步骤(2)中还添加了TOOS,牛血清白蛋白。
4.根据权利要求1所述的测定样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇的方法,其特征在于:所述的步骤(1)和步骤(2)中还添加了缓冲液、防腐剂或保护剂中的一种或者多种的混合。
5.一种测定样本中小而密低密度脂蛋白胆固醇的试剂,其特征在于:包括第一试剂组合物和第二试剂组合物,其中第一试剂组合物包括胆固醇酯酶和离子选择剂,还添加了胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4氨基安替比林和Emulgen B66;所述离子选择剂用于消除样本中的HDL-C、VLDL-C、CM-C以及大而轻LDL-C;第二试剂组合物包括曲拉通X-100;
所述的离子选择剂选自以下类型的物质:
1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、1-正己基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑甲磺酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑三氟甲烷磺酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑甲基硫酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑硝酸盐、1-丁基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐、1-丁基-4-甲基吡啶四氟硼酸盐、1-辛基-4-甲基吡啶四氟硼酸盐、1-丁基-1甲基吡咯烷溴盐、三己基十四烷基六氟磷酸磷、四丁基甲磺酸铵、三乙基硫双(三氟甲基磺酰)亚胺、1-乙基-3-甲基咪唑甲磺酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑十二烷基磺酸盐、聚赖氨酸聚乙二醇共聚物。
6.根据权利要求5所述的测定样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇的试剂,其特征在于:所述胆固醇酯酶含量为0.1-50KU/L;所述离子选择剂的含量为0.01%-1%;所述曲拉通X-100含量为0.01%-5%。
7.根据权利要求6所述的测定样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇的试剂,其特征在于:所述胆固醇酯酶含量为1-5KU/L;所述离子选择剂的含量为0.02%-0.5%;所述曲拉通X-100含量为0.1%-3%。
8.根据权利要求7所述的测定样本中的小而密低密度脂蛋白胆固醇的试剂,其特征在于:所述胆固醇酯酶含量为3KU/L;所述离子选择剂的含量为0.1%;所述曲拉通X-100含量为1%。
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