[发明专利]一种银杏的组织培养方法及生根培养基有效

专利信息
申请号: 201710483974.3 申请日: 2017-06-23
公开(公告)号: CN107047319B 公开(公告)日: 2019-03-22
发明(设计)人: 喻娜;向丹;崔帅;赵静 申请(专利权)人: 广安职业技术学院
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 北京弘权知识产权代理事务所(普通合伙) 11363 代理人: 逯长明;许伟群
地址: 638000 四*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 一种 银杏 组织培养 方法 生根 培养基
【权利要求书】:

1.一种银杏的组织培养方法,其特征在于,包括:

制备MS培养基母液;所述MS培养基母液由大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液以及有机物母液组成;

配制浓度为1g/L的6-苄氨基嘌呤溶液和浓度为1g/L萘乙酸溶液;

分别以银杏树枝和银杏果壳为原料,制备得到银杏树枝活性炭和银杏果壳活性炭;

以琼脂、蔗糖、所述MS培养基母液、所述6-苄氨基嘌呤溶液和所述萘乙酸溶液,以及所述银杏树枝活性炭或所述银杏果壳活性炭为原料,制备生根培养基;

取外植体,所述外植体为银杏侧芽带叶茎尖;

对所述外植体进行消毒处理;

将消毒处理后的所述外植体接种到所述生根培养基中;

将接种后的所述生根培养基置于500lux-1000lux光照、20℃-25℃环境下培养。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述对外植体进行消毒处理的步骤包括:

将所述外植体置于洗衣粉水中浸泡1h-3.5h后,用流水冲洗5min-15min;

采用自来水,对流水冲洗后得到的外植体浸泡4-5次,每次5min;

将自来水浸泡后得到的外植体置于70%的乙醇溶液中浸泡0.75min-2min,并用无菌水冲洗3-4次,每次1min;

采用0.5%的新洁尔灭,对无菌水冲洗后得到的外植体处理8min-25min,并用无菌水冲洗3-4次,每次1min。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述以琼脂、蔗糖、所述MS培养基母液、所述6-苄氨基嘌呤溶液和所述萘乙酸溶液,以及所述银杏树枝活性炭或所述银杏果壳活性炭为原料,制备生根培养基的步骤包括:

分别量取50mL所述大量元素母液、5mL所述微量元素母液、5mL铁盐母液和5mL有机物母液,混合得到MS培养基母液;

分别称取7g-8g琼脂、0-15g蔗糖,以及2g-10g所述银杏树枝活性炭或2g-10g所述银杏果壳活性炭,加入到所述MS培养基母液中,采用蒸馏水定容至1L;

向定容后的所述MS培养基母液中加入0.5mL-1.5mL所述6-苄氨基嘌呤溶液以及0.1mL-0.3mL所述萘乙酸溶液,加热搅拌至所述琼脂完全溶解,得到混合体;

将所述混合体的pH调节至5.2-5.8,分装到培养瓶中;

将所述培养瓶置于121℃下灭菌30min,得到生根培养基。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述蔗糖的加入量为0g。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述银杏树枝活性炭加入量为6g,所述银杏果壳活性炭的加入量为5g,所述6-苄氨基嘌呤溶液的加入量为1mL,所述萘乙酸溶液的加入量为0.15mL。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述大量元素母液的成分及浓度为:硝酸铵1650mg/L、硝酸钾1900mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、七水合硫酸镁370mg/L以及无水氯化钙440mg/L。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述微量元素母液的成分及浓度为:碘化钾0.83mg/L、硫酸锰22.3mg/L、硼酸6.2mg/L、硫酸锌8.6mg/L、钼酸钠0.25mg/L、硫酸铜0.025mg/L以及氯化钴0.025mg/L。

8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述铁盐母液的成分及浓度为:硫酸亚铁27.8mg/L和乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L。

9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述有机物母液的成分及浓度为:肌醇100mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸多吡醇0.5mg/L以及甘氨酸2mg/L。

10.一种用于银杏组织培养的生根培养基,其特征在于,包括琼脂、MS培养基母液、6-苄氨基嘌呤溶液和萘乙酸溶液,以及银杏树枝活性炭或银杏果壳活性炭;

所述MS培养基母液由大量元素母液、微量元素母液、铁盐母液以及有机物母液组成;

所述银杏树枝活性炭由银杏树枝制备而成;

所述银杏果壳活性炭由银杏果壳制备而成。

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