[发明专利]一种绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法

说明书

本专利公开了一种绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法，将绞股蓝药材低温烘干、粉碎、过筛后，超声波加热提取，澄清，过滤，抽滤，上清液浓缩后通过大孔树脂吸附，乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇味，冷冻、冻干后得到总皂苷样品，将总皂苷样品用去离子水溶解，加酸加热水解，水解结束后调节溶液pH值，薄层色谱法鉴定寡糖，最后将水解后得的溶液浓缩、大孔树脂吸附，去离子水洗脱至无糖后，收集洗脱液，浓缩，冷冻、冻干后得绞股蓝皂苷侧链寡糖。本发明的优点在于绞股蓝总皂苷的提取溶剂为水，溶剂成本小，无毒易获取，药材粉碎后加热超声波提取，提取时间在15～45min，大大降低提取时间，提高工作效率，缩短绞股蓝总皂苷的生产周期。

技术领域

本发明涉及一种中药材制备技术领域，具体涉及一种绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法。

背景技术

绞股蓝（Gynostemma Pentaphyllum(Thunb.)Makino）为葫芦科绞股蓝属多年生藤本植物的干燥全草，主要分布于我国南部，号称“南方人参”，1986年被国家科委列为待开发的首位“名贵中药材”，2003年被国家卫生部列入保健品名单。现代药理学研究表明，绞股蓝具有降低血脂、降血压、防止衰老、抑制肿瘤、增强免疫力、保护血管、抗动脉粥样硬化等作用，这些药理作用主要是由绞股蓝中的有效活性成分产生的。研究表明，绞股蓝全草中含有绞股蓝皂苷、绞股蓝多糖、黄酮类、蛋白质、脂肪、维生素和纤维素等，其中的主要活性成分为皂苷类、多糖类和黄酮类。目前，研究证实的绞股蓝皂苷多达84种，其中有6种的结构和人参皂苷相同，且在优良体系绞股蓝中，这6种皂苷的含量均高于人参。除此之外，很多绞股蓝皂苷水解产生的次生苷，苷元和次级苷元和人参皂苷水解产物相同。所以，绞股蓝号称“南方人参”。

绞股蓝皂苷的基本化学结构是达玛烷型四环三萜类，C3位和C20位羟基上多半连接糖链，主要由β-D-葡萄吡喃糖、α-L-鼠李吡喃糖和β-D-木吡喃糖组成，亦有少数的α-L-阿吡喃糖，现在的研究主要集中在皂苷、苷元的分离和活性研究上，对皂苷侧链上的糖链研究甚少。

绞股蓝总皂苷的提取方法已有很多文献及专利报道，如CN201410481903.6报道了一种从绞股蓝中提取纯化绞股蓝皂苷的方法，CN103923150B报道了绞股蓝皂苷及其制备方法。然而，已有的报道中没有对其侧链寡糖进行进一步的研究。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在提供一种绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法。

本方案中一种绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法，包括以下步骤：

（1）将绞股蓝低温干燥后粉碎成粉末，过筛形成绞股蓝粉末，将绞股蓝粉末和去离子水按重量比1：40～60的比例混合后超声波加热进行提取，提取结束后，澄清，过滤得到滤液；

（2）在步骤（1）的滤液中放入硅藻土进行抽滤，得到澄清的溶液，将溶液浓缩后得浓缩液；

（3）将步骤（2）中浓缩液通过预处理好的大孔树脂进行吸附，用水洗脱至无色，再使用70～90%的乙醇洗脱，得到乙醇洗脱液；

（4）将步骤（3）中乙醇洗脱液浓缩，然后冷冻得绞股蓝总皂苷样品；

（5）取步骤（4）中绞股蓝总皂苷样品于反应瓶中，用去离子水配制成含绞股蓝总皂苷1%的溶液，然后在溶液中加入三氯乙酸，随后通入氮气，密封后放入干燥箱中加热水解，水解结束后取出，迅速冰浴降温，然后在降温后的水解液中加入氨水调节pH值至6.5～8；

（6）取步骤（5）中水解液，浓缩后使用预处理好的大孔树脂吸附，用水洗脱至无糖分出现，收集水洗脱液，将其浓缩、冷冻后得到绞股蓝总皂苷侧链寡糖。