[发明专利]一种绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法

权利要求书

1.一种绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将绞股蓝低温干燥后粉碎成粉末，过筛形成绞股蓝粉末，将绞股蓝粉末和去离子水按重量比1：40～60的比例混合后超声波加热进行提取，其中，超声波功率为20W，热提温度为85℃，提取时间30min，提取结束后，澄清，过滤得到滤液；

（2）在步骤（1）的滤液中放入硅藻土进行抽滤，得到澄清的溶液，将溶液浓缩后得浓缩液；

（3）将步骤（2）中浓缩液通过预处理好的大孔树脂进行吸附，用水洗脱至无色，再使用70～90%的乙醇洗脱，得到乙醇洗脱液；

（4）将步骤（3）中乙醇洗脱液浓缩，然后冷冻得绞股蓝总皂苷样品；

（5）取步骤（4）中绞股蓝总皂苷样品于反应瓶中，用去离子水配制成含绞股蓝总皂苷1%的溶液，然后在溶液中加入三氯乙酸，随后通入氮气，密封后放入干燥箱中加热水解，水解温度为120℃，水解时间12h，水解结束后取出，迅速冰浴降温，然后在降温后的水解液中加入氨水调节pH值至6.5～8；

（6）取步骤（5）中水解液，浓缩后使用预处理好的大孔树脂吸附，用水洗脱至无糖分出现，收集水洗脱液，将其浓缩、冷冻后得到绞股蓝总皂苷侧链寡糖。

2.根据权利要求1所述的绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）的干燥温度为35～45℃，粉碎粒径为50～300目，提取溶剂为去离子水。

3.根据权利要求1所述的绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）的硅藻土抽滤具体步骤为：将2层润湿的定性滤纸置于玻璃砂芯漏斗上，打开水泵，滤纸吸附在漏斗上，加入1～2cm厚的硅藻土，铺匀，再加去离子水润湿后即可加样。

4.根据权利要求1所述的绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）的大孔树脂预处理方法为95%乙醇浸泡24h后装柱，用95%乙醇洗至流出液与水1：5不浑浊，用去离子水洗至无醇味，再用5%HCl通过树脂柱，浸泡2～4h后去离子水洗至中性，再使用2%NaOH通过树脂柱，浸泡2～4h后去离子水洗至中性，即得处理好的大孔树脂。

5.根据权利要求1所述的绞股蓝皂苷侧链寡糖的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)浓缩为旋转蒸发，旋转温度为40～50℃，转速为100～180rpm，浓缩体积为20～50mL，冷冻方法为-80℃冰箱冷冻8～12h，冻干方法为冷冻干燥机中24～72h。