[发明专利]兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法

权利要求书

1.兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，包括以下步骤：

A、人工杂交授粉：以长瓣兜兰为母本， 小叶兜兰为父本，选取生长健壮的长瓣兜兰母本及父本在开花时开展人工辅助授粉，授粉后370到390天，将发育至基本成熟而未开裂的果实作为外植体；

B、 无菌播种及原球茎萌发阶段：选用饱满的果实用酒精浸泡 ，置于的升汞溶液中消毒，无菌水冲洗，用解剖刀切开果实，用接种针将褐色粉末种子接种到培养基上，培养80-100天，形成原球茎及芽混合体；

C、增殖分化培养阶段：为获得更多的种苗，将芽和原球茎混合组织接种在1/2MS添加6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、α-萘乙酸（NAA）培养基上，经140-160天培养，长成丛生带短根的小苗；

D、壮苗生根阶段：将长成的丛生植株分开，接种到1/4MS添加α-萘乙酸（NAA）的培养基上，直到长成具2-3条根、3-4片叶的完整植株；

E、 炼苗及移栽：当试管苗长至3-4厘米时出瓶，出瓶前在温室中的自然光照下炼苗，然后将其从玻璃瓶中取出，移入碎树皮和腐殖土的混合基质中；加强温度、温度、遮阴及通风管理，“优优兜兰”即可正常生长，成苗的移栽成活率可达90％以上；定期浇一次含氮、磷、钾的复合肥，薄肥勤施，栽培中加强病虫害管护措施即可建立兜兰新品种“优优兜兰”种苗的产业化培育方法体系。

2.根据权利要求1所述的兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，其特征在于：8月初兜兰开花季节，人工控制调节父母本的开花状况，母本长瓣兜兰花苞快张开时，喷洒一次浓度为1000PPM的乙烯利来促进长瓣兜兰开花，一周后再用同样的方法促进小叶兜兰开花，以长瓣兜兰开花开始计算时间两周后再进行人工辅助授粉，这时长瓣兜兰柱头分泌大量粘液，小叶兜兰花粉具活力，杂交亲和力强，效果最佳，果实饱满，种子组培后成活率高。

3.根据权利要求1所述的兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，其特征在于：步骤B中，所述的用酒精浸泡时，选用75％的酒精，浸泡时间为5min；升汞溶液中消毒指0.1％的升汞溶液，浸泡10 min；所述的无菌水为蒸馏水或肥皂水。

4.根据权利要求1所述的兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，其特征在于：步骤B中，所述的培养基是指1/2MS添加6-苄基氨基嘌呤(6-BA)0.5-1.0毫克/升、α-萘乙酸（NAA0.1-0.2毫克/升培养基。

5.根据权利要求1所述的兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，其特征在于：步骤B中，无菌播种及原球茎萌发阶段培养90天时进行下一步骤。

6.根据权利要求1所述的兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，其特征在于：步骤C中培养基配方中，6-苄基氨基嘌呤(6-BA)浓度为2-4毫克/升，α-萘乙酸（NAA）浓度为0.1-0.5毫克/升，培养时间为150天为佳。

7.根据权利要求1所述的兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，其特征在于：步骤D中，丛生植株分开后接种到1/4MS添加α-萘乙酸（NAA）0.1-0.5毫克/升的培养基上，培养55-65天后长成具2-3条根、3-4片叶的完整植株。

8.根据权利要求1-7任一权利要求所述的兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，其特征在于：步骤E中，当试管苗长至3-4厘米时，出瓶前在温室中的自然光照下炼苗10天，然后将其从玻璃瓶中取出，洗净根部的培养基，移入碎树皮和腐殖土为4:1的混合基质中；温室保持15-28℃的温度、80%以上的湿度、70-80%的遮阴并通风，“优优兜兰”即可正常生长，成苗的移栽成活率可达90％以上；通常15天左右浇一次氮：磷：钾的比例为14：16；15的复合肥1000倍，薄肥勤施，栽培中加强病虫害管护措施。