[发明专利]多重荧光PCR法检测幽门螺旋杆菌耐药基因突变的试剂盒在审
申请号: | 201710471030.4 | 申请日: | 2017-06-20 |
公开(公告)号: | CN107099611A | 公开(公告)日: | 2017-08-29 |
发明(设计)人: | 陈智林;童超;魏莎莎;高幼冷 | 申请(专利权)人: | 嘉兴雅康博贝南生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12R1/01 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 314000 浙江省嘉兴*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 多重 荧光 pcr 检测 幽门 螺旋 杆菌 耐药 基因突变 试剂盒 | ||
1.一种多重荧光PCR法检测幽门螺旋杆菌耐药基因突变的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括如下:
克拉霉素耐药反应缓冲液,包含CLW上游引物、CLW探针、2142下游引物、2143下游引物、2182下游引物、内控引物及探针、dNTPs、MgCl2、KCl;
四环素耐药反应缓冲液,包含TET引物及探针、内控引物及探针、dNTPs、MgCl2、KCl;
奎诺酮耐药反应缓冲液,包含LT下游引物、LT探针、LT87上游引物、LT88上游引物、LT91上游引物、内控引物及探针、dNTPs、MgCl2、KCl;
阿莫西林耐药反应缓冲液包,含S414R引物及探针、Y484C引物及探针、T541I引物及探针、P600T引物及探针、内控引物及探针、dNTPs、MgCl2、KCl。
2.根据权利要求1所述的一种多重荧光PCR法检测幽门螺旋杆菌耐药基因突变的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括如下:
酶混合液包含热启动Taq酶及UNG酶;
阳性对照包含质粒及TE水;
阴性对照包含TE水。
3.根据权利要求1所述的一种多重荧光PCR法检测幽门螺旋杆菌耐药基因突变的试剂盒,其特征在于:所述的克拉霉素耐药反应缓冲液中CLW上游引物为:caagggtggtatctcaagga、CLW探针为:FAM-ttcaaagcctcccacctatcctgc-BHQ1;2142下游引物为acccgcgacaagacggg;2143下游引物为acccgcgacaagacggag;2182下游引物为:ctacaacttatcactgctaat;内控引物为:F:caacgtgtcagtggtggac、R:gtcaaaggtggaggagtggg,内控探针为:ROX- gccgtctagaaaaacctgcc-BHQ2。
4.根据权利要求1所述的一种多重荧光PCR法检测幽门螺旋杆菌耐药基因突变的试剂盒,其特征在于:所述的四环素耐药反应缓冲液中TET引物为:F:gcatgtggtttaattcgattc、R:cagcacctgttttcaaggtc,TET探针为:FAM-aggcttgacattgagagaatccgc-BHQ1;
内控引物为:F:caacgtgtcagtggtggac、R:gtcaaaggtggaggagtggg,内控探针为:ROX- gccgtctagaaaaacctgcc-BHQ2。
5.根据权利要求1所述的一种多重荧光PCR法检测幽门螺旋杆菌耐药基因突变的试剂盒,其特征在于:所述的奎诺酮耐药反应缓冲液中LT下游引物为:ctgcccatccactaattcc、LT探针为:FAM-tggcgcaagatttttccatgc-BHQ1;LT87上游引物为cccccatggcgataaa;LT88上游引物为cccatggcgataacgt;LT91上游引物为:cgataacgcggtttatgg;内控引物为:F:caacgtgtcagtggtggac、R:gtcaaaggtggaggagtggg,内控探针为:ROX- gccgtctagaaaaacctgcc-BHQ2。
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