[发明专利]一种赭曲霉素A分子印迹聚合物的制备方法

说明书

本发明涉及一种赭曲霉素A分子印迹聚合物的制备方法，该方法的具体步骤为：利用单醛对壳聚糖进行预交联；所得的预交联壳聚糖与甲基环氧氯丙烷反应得到壳聚糖环氧树脂预聚物；壳聚糖环氧树脂预聚物与赭曲霉素A混合后，进行聚合；对壳聚糖环氧树脂进行物理、化学清洗，最终得到壳聚糖环氧树脂。本发明利用亲水性壳聚糖作为聚合单体，首先用单醛封闭壳聚糖上的氨基反应位点，保证了壳聚糖环氧树脂预聚物的顺利合成；用单醛封闭壳聚糖上的氨基反应位点，保证了壳聚糖环氧树脂与赭曲霉素A不会发生共价结合；单醛上的烷基链为赭曲霉素A中的疏水基团提供了完美的疏水环境，使得壳聚糖环氧树脂预聚物与赭曲霉素A具有良好的亲附性。

技术领域

本发明涉及一种分子印迹聚合物的制备方法，特别是一种赭曲霉素A分子印迹聚合物的制备方法。

背景技术

赭曲霉毒素是继黄曲霉毒素后又一个引起世界广泛关注的霉菌毒素。它是由曲霉属的7种曲霉和青霉属的6种青霉菌产生的一组重要的、污染食品的真菌毒素。其中毒性最大、分布最广、产毒量最高、对农产品的污染最重、与人类健康关系最密切的是赭曲霉毒素A。与黄曲霉毒素的检测方法一样，赭曲霉毒素A的检测方法有薄层层析法、高效液相色谱法、酶联免疫吸附法、放射免疫测定法、免疫亲和层析柱-高效液相色谱法、免疫亲和层析柱-荧光光度法等。目前免疫亲和层析柱-高效液相色谱法和免疫亲和层析柱-荧光光度法，具有快速、灵敏、准确的特点，已被国家标准GB/T18979-2003所采用。然而，免疫亲和柱所需的抗体制备不易，且质量稳定性与产品稳定性都难以控制。

分子印迹聚合物是一类以小分子化合物为模板，通过物理包埋和化学聚合而制备的新型功能材料。分子印迹的制备理念与抗原抗体的亲和原理非常接近。由于分子印迹聚合物可选择的聚合单体具有化学多样性、能够充分预测最终聚合物的结构和功能属性，该聚合物通常都选择结构上没有活泼基团的单体，因此具有热稳定性好和使用寿命长等优点。由于其聚合过程中包埋了分子印迹，而聚合物的化学稳定性导致分子印迹能够非常稳定的保持下去。因此，分子印迹聚合物可以作为高灵敏度的物理吸附剂广泛应用于生物、药品和食品等样品处理及检测等方面。

壳聚糖作为一种廉价易得的生物高分子材料已经被应用于分子印迹的研究之中。壳聚糖分子中具有氨基和羟基，因此改性的方式多，反应灵活。然而，如何利用壳聚糖上的活性基团，制备出特异性的分子印迹是一个研究难点。

发明内容

本发明提供了一种赭曲霉素A分子印迹聚合物的制备方法，为现有赭曲霉素A检测方法提供了全新的思路，利用针对赭曲霉素A的分子印迹聚合物作为吸附剂，对样品中的赭曲霉素A的含量进行检测，具有操作方便，聚合物可做到无限次回收套用，对于赭曲霉素A的检测灵敏度高，检测结果准确等优点。

为实现上述目的，本发明提供了一种赭曲霉素A分子印迹聚合物的制备方法。该方法利用单醛对壳聚糖进行预交联，所得的预交联壳聚糖与甲基环氧氯丙烷反应得到壳聚糖环氧树脂预聚物；壳聚糖环氧树脂预聚物与赭曲霉素A混合后，进行聚合；然后通过对包埋了赭曲霉素A的壳聚糖环氧树脂进行物理、化学清洗，最终得到壳聚糖环氧树脂，用壳聚糖环氧树脂即可快速检测出赭曲霉素A。

本发明利用亲水性壳聚糖作为聚合单体，首先用单醛封闭壳聚糖上的氨基反应位点，能够完美的控制壳聚糖中氨基的活性，从而使与甲基环氧氯丙烷的反应位点控制在壳聚糖上的羟基位置，同时也保证了壳聚糖环氧树脂与赭曲霉素A不会发生共价结合；单醛上的烷基链以及环氧基的聚合反应发生后产生的结合态氧与赭曲霉素A结构上的羟基形成氢键，并且为赭曲霉素A提供了良好的极性与非极性环境。

本发明提供了一种赭曲霉素A分子印迹聚合物的制备方法。具体的制备步骤如下：

1)壳聚糖预交联步骤如下：