[发明专利]基于温敏阳离子聚合物的siRNA载体及其制备方法

权利要求书

1.一种基于温敏阳离子聚合物的siRNA载体，其特征在于该聚合物的结构式为：

其中m：n＝3～5，m＝10～15，n＝3～5，X＝MeO-或X＝EtO-中的任意一种。

2.一种制备根据权利要求1所述的基于温敏阳离子聚合物的siRNA载体的方法，其特征在于该方法的具体步骤：

a.在惰性气氛下，将氨基基元单体、二代烷氧醚树枝化单体和偶氮类引发剂以1：10～1：20的摩尔比，溶于N，N-二甲基甲酰胺中，70℃～75℃反应10～12h，冷却至室温，加入二氯甲烷溶解，分离提纯，得到含有叔丁氧羰基的聚合物，其结构式为：

所述的氨基基元单体的结构式为：

所述的二代烷氧醚树枝化单体的结构式为：

b.将步骤a所得含有叔丁氧羰基的聚合物和三氟乙酸1：50～1：100的质量比溶于二氯甲烷，常温反应3～4h，脱去氨基基元封端的叔丁氧羰基，结束后向反应溶液中加入甲醇溶解，并蒸干甲醇，抽真空得到基于温敏阳离子聚合物的siRNA载体。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的氨基基元单体的具体制备方法为：

a.将2-[2-(2-t-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇溶于四氢呋喃中，加入氢氧化钠水溶液混溶均匀，2-[2-(2-t-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇与氢氧化钠质量比为3：1～5：1，冰浴冷却，缓慢滴加对甲苯磺酰氯的四氢呋喃溶液，2-[2-(2-t-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇与对甲苯磺酰氯的质量比为1：1～1：1.3，反应3～4h，蒸干四氢呋喃并加入二氯甲烷与水萃取，经分离提纯得到化合物1，化合物1结构式为：

b.在惰性气氛下，将步骤a所得化合物1、没食子酸甲酯、干燥碳酸钾和干燥碘化钾以质量比10：1.3：10：0.8～10：1.5：15：1的比例混合并溶于N，N-二甲基甲酰胺中，80℃～85℃反应，22～24h，蒸干溶剂，加入二氯甲烷与水萃取，经分离提纯得到化合物2，化合物2结构式为：

c.在惰性气氛下，冰浴中，将步骤b所得将化合物2溶于干燥的四氢呋喃之中，缓慢滴入氢化锂铝粉末的四氢呋喃悬浊液，所述的化合物2与氢化铝锂的质量比为11：1～9：1，搅拌反应进行3～4h，加甲醇终止反应，过滤并蒸干四氢呋喃，用二氯甲烷与水萃取，分离提纯得到化合物3，化合物3结构式为：

d.在惰性气氛下，冰浴中，将步骤c所得化合物3、三乙胺和4-二甲氨基吡啶按8：1：1～8：2：1.5的质量比溶于干燥的二氯甲烷中，缓慢加入甲基丙烯酰氯，其中化合物3与甲基丙烯酰氯的质量比为4：1～5：1，反应时间为3～4小时，用甲醇终止反应，加入水进行萃取，然后分离提纯得到氨基基元单体，其结构式为：

4.一种权利要求1中所述的基于温敏阳离子聚合物的siRNA载体的应用，其特征在于在相变前对siRNA进行吸附且通过升温相变释放siRNA。