[发明专利]一种同时测定广藿香中六种化学成分的含量测定方法

说明书

本发明属于中药领域，具体的涉及到一种同时测定广藿香中六种化学成分含量测定方法。为了提高广藿香药材质量控制水平，建立更加科学、合理的质量标准，首次采用UPLC对广藿香药材中6个成分进行含量测定，为提高广藿香药材乃至其相关制剂的质量控制方法提供一定的实验依据。

技术领域

本发明属于中药领域，具体的涉及到一种同时测定广藿香中六种化学成分含量测定方法。

背景技术

广藿香为唇形科植物广藿香Pogostemoncablin (Blanco) Benth.的干燥地上部分。具有芳香化浊，和中止呕，发表解暑的功效。用于湿浊中阻，脘痞呕吐，暑湿表证，湿温初起，发热倦怠，胸闷不舒，寒湿闭暑，腹痛吐泻，鼻渊头痛。广藿香原产东南亚等国，我国的广藿香主要由越南、马来西亚等国家引种，均为栽培，现主要分布于广东、海南等地，是我国十大南药之一。广藿香传统商品药材按产地分为石牌广藿香、高要广藿香、海南广藿香（包括湛江产），但目前市场上流通的主流商品产地主要是广东湛江以及海南万宁地区。《中国药典》2015年版以百秋李醇的含量对广藿香进行质量控制，该方法只针对广藿香的挥发性成分进行质量控制，不能对广藿香药材进行全面有效的质量控制。广藿香中化学成分有多种，主要有黄酮类、苯乙醇苷类、萜类和甾体等等。本发明通过对广藿香的化学成分研究，分离得到含量较高的毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、列当苷以及新西兰牡荆苷2，另外通过液质联用指认出广藿香中含有藿香黄酮醇和广藿香酮，其中毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、列当苷属于苯乙醇苷类，新西兰牡荆苷2和藿香黄酮醇属于黄酮类。研究表明广藿香酮和广藿香中黄酮类具有抗菌活性，苯乙醇苷类化合物具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、神经保护、免疫调节、增强记忆等作用，为了提高广藿香药材质量控制水平，建立更加科学、合理的质量标准，本试验首次采用UPLC对广藿香药材中6个成分进行含量测定，为提高广藿香药材乃至其相关制剂的质量控制方法提供一定的实验依据。

发明内容

本发明所述的同时测定广藿香中六种化学成分的含量测定方法，包括以下步骤：

A、混合对照品溶液的配制：称取毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、藿香黄酮醇、广藿香酮、新西兰牡荆苷2和列当苷对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1mL含毛蕊花糖苷170μg、异毛蕊花糖苷、新西兰牡荆苷2和列当苷各40μg、藿香黄酮醇和广藿香酮各20μg的溶液，混匀，即得；

B、供试品溶液的制备：取广藿香药材粉碎，取药材粉末0.5-5g，精密称定，用50%甲醇—100%甲醇超声提取10-60min，滤过，即得；

C、色谱条件：色谱柱为C₁₈柱；流动相：A为乙腈， B为0.1% 磷酸溶液，梯度洗脱，0～10min，8%A～14.5%A；10～20 min，14.5%A；20～20.1 min，14.5%A～40%A；20.1～32 min，40%A；32～40 min，40%A～52%A；流速：0.2-0.5mL/min；柱温：25-40℃；检测波长：309 nm；进样体积：1-5μL。

优选的本发明所述的同时测定广藿香中六种化学成分的含量测定方法，包括以下步骤：

A、混合对照品溶液的配制：称取毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、藿香黄酮醇、广藿香酮、新西兰牡荆苷2和列当苷对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1mL含毛蕊花糖苷170μg、异毛蕊花糖苷、新西兰牡荆苷2和列当苷各40μg、藿香黄酮醇和广藿香酮各20μg的溶液，混匀，即得；

B、供试品溶液的制备：取广藿香药材粉碎，过四号筛，取药材粉末0.5 g，精密称定，置于 50 mL 具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25 mL，密塞，称定重量，超声处理10min，取出，放冷，再称定重量，用50% 甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液，滤过，取续滤液，过0. 22μm滤膜，即得；