[发明专利]一种组织病理学的组织样本的处理方法在审
申请号: | 201710463604.3 | 申请日: | 2017-06-19 |
公开(公告)号: | CN107271233A | 公开(公告)日: | 2017-10-20 |
发明(设计)人: | 陈奎生;孙淼淼;姜国忠;赵志华;杨建萍;吕新全;韦娜;张红新;郑湘予;高冬玲 | 申请(专利权)人: | 郑州大学第一附属医院 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙)61223 | 代理人: | 俞晓明 |
地址: | 450052 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 组织 病理学 样本 处理 方法 | ||
1.一种组织病理学的组织样本的处理方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,对离体的组织样本进行固定、冲洗、脱水、透明、浸蜡包埋、切片操作,得到石蜡组织切片;
步骤2,染色
步骤2.1,采用脱蜡液对石蜡组织切片浸泡脱蜡10min,得到脱蜡切片;其中,脱蜡液由以下重量份的组分混合后制成:D-柠檬烯58-60份、甲基环己烷40-42份;
步骤2.2,依次用复水液A、复水液B、复水液C、复水液D、复水液E浸泡处理,然后用复水液F冲洗处理3min,得到复水切片;
其中,复水液A由二甲苯和无水乙醇按照1:1的体积比例混合而成,复水液A浸泡时间为5min;复水液B、复水液C、复水液D、复水液E依次是体积分数95%乙醇、70%乙醇、45%乙醇、30%乙醇,且复水液B、复水液C、复水液D、复水液E的溶剂均为0.01mol/L的柠檬酸钠溶液;复水液B-复水液E的浸泡时间均为3min;复水液F是ddH2O;
步骤2.3,依次用染色液A浸泡复水切片3-5min,水冲洗15-20s,盐酸-乙醇溶液冲洗1-2s,水冲洗2-3s,饱和碳酸锂溶液冲洗15-20s,水冲洗直至切片变色,染色液B浸泡3-5min,水冲洗2-3s,复水液D冲洗5-10s、复水液C冲洗5-10s、复水液B冲洗5-10s,无水乙醇脱水,二甲苯透明,得到透明切片;
所述染色液A由以下重量份的组分混合而成:苏木精1份、硫酸铝钾15份、无水乙醇10份、氯化汞0.5份、氯化钠0.5-0.9份、去离子水200份;使用时每100ml染色液A加入5ml冰醋酸;
所述染色液B是将1g伊红溶解入100ml 95%乙醇中制备而成,使用时每100ml染色液A加入50μL冰醋酸;
步骤3,采用中性树脂对染色切片进行封片,完成对组织样本的处理。
2.根据权利要求1所述的组织病理学的组织样本的处理方法,其特征在于,所述脱蜡液由以下重量份的组分混合后制成:D-柠檬烯58份、甲基环己烷42份。
3.根据权利要1所述的组织病理学的组织样本的处理方法,其特征在于,所述盐酸-乙醇溶液由0.5mL盐酸和99mL 75%酒精混合而成。
4.根据权利要求1所述的组织病理学的组织样本的处理方法,其特征在于,所述染色液A由以下重量份的组分混合而成:苏木精1份、硫酸铝钾15份、无水乙醇10份、氯化汞0.5份、氯化钠0.5份、去离子水200份。
5.根据权利要求1所述的组织病理学的组织样本的处理方法,其特征在于,所述染色液A按以下方法制备:先用去离子水加热溶解硫酸铝钾、氯化钠,得硫酸铝钾溶液,用无水乙醇溶解苏木精,得苏木精溶液;然后将硫酸铝钾溶液和苏木精溶液混合,煮沸1min,冷却20-30s,加入氯化汞,加热搅拌直至颜色变为紫红色,滤纸过滤后,每100ml染色液A加入5ml冰醋酸,备用。
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