[发明专利]一株耐高温酿酒酵母菌株及其构建方法在审
| 申请号： | 201710461602.0 | 申请日： | 2017-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN107641604A | 公开（公告）日： | 2018-01-30 |
| 发明（设计）人： | 肖冬光;郝爱丽;董健;付肖蒙;郭学武;张翠英 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12P7/06;C12R1/865 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300457 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 耐高温 酿酒 酵母 菌株 及其 构建 方法 | ||
1.选育出的高耐受酿酒酵母菌株，是在酿酒酵母出发菌株中敲除SCH9基因获得。
2.如权利要求1所述的高耐受酿酒酵母菌株，其特征在于，所述出发菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CICC32315。
3.如权利要求1所述的高耐受酿酒酵母菌株，其特征在于，所述酿酒酵母具有正常的生长性能，对55℃热激以及8％(v/v)乙醇都有一定的耐受性，并在38℃玉米原料高温浓醪发酵中乙醇产量相对亲本菌株提高了16.4％。
4.如权利要求1所述的高耐受酿酒酵母菌株的构建方法，其特征在于，所述构建方法是通过长引物敲除法，以酵母体内固有的URA3基因作为筛选标记，避免了外源基因的残留。
5.如权利要求4所述的高耐受酿酒酵母菌株的构建方法，其特征在于，具体步骤包括：本研究以SCH9基因作为靶序列，以提供的酿酒酵母工业菌株为出发菌株，以酵母体内固有的URA3基因作为筛选标记。使用带有待敲除基因SCH9的40bp同源序列和带有URA3基因的19bp同源序列的长引物进行PCR扩增得到带有同源臂的片段，将重组片段利用醋酸锂转化法导入到感受态酿酒酵母细胞中，通过与酵母染色体上的同源序列发生重组，经抗性板筛选出转化子，通过PCR全长验证得到AY12a-SCH9Δ突变菌株，即URA3基因替代了酵母染色体上的SCH9基因，从而实现了SCH9基因的敲除。将AY12a-SCH9Δ与AY12α进行回交融合，然后再生孢分离单倍体，即获得新的AY12a-SCH9Δ突变株及AY12α-SCH9Δ突变株。
6.如权利要求2所述的耐高温酿酒酵母菌株在乙醇生产中的应用。
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