[发明专利]一种胶原蛋白‑硫酸乙酰肝素复合敷料的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种敷料，具体为一种胶原蛋白-硫酸乙酰肝素复合敷料的制备方法。

背景技术

创伤修复是一个复杂而渐进的过程，包括受损组织的清除、细胞的聚集、组织的再生、瘢痕形成和创面封闭等过程。创面修复是机体应答皮肤损伤所表现的一个复杂的生物学过程，主要包括局部炎症反应阶段、细胞增殖分化阶段和组织重建阶段。局部微环境的变化，包括创伤局部各种细胞、细胞外基质及生长因子等的相互作用，对创面愈合有极大影响。

越来越多的基础研究和临床研究均表明，湿性伤口敷料能够加速创面愈合。现已证明，湿性敷料能使伤口再上皮化能力显著提高，使创面以更快的速度愈合，覆盖急性浅层创面的愈合速度比传统敷料平均快3～4d。湿性敷料促进创面愈合的主要机制是：促进多种生长因子释放，加快创面愈合速度；保持创面低氧张力，刺激毛细血管增生，利于创面成纤维细胞或表皮细胞生长，并可刺激巨噬细胞释放多种生长因子；有利于坏死组织与纤维蛋白溶解；有助于宿主巨噬细胞等在创面的聚集，增强局部抗致病微生物的防御，有利于控制感染、抑制入侵致病菌生长和降低感染发病率。目前临床上应用的具有促进伤口愈合的湿性敷料主要包括薄膜类敷料、藻酸盐敷料、水凝胶敷料、水胶体敷料等。在实际应用中，常根据伤口情况选择合适的敷料。通常，一期愈合的伤口宜选用纱布、薄膜类敷料；浅层伤口宜选用薄膜类；干性坏死的伤口宜选用水凝胶、水胶体类敷料；少到中度渗液的伤口选用水凝胶类；中度到重度渗液的伤口宜选用藻酸盐类、泡沫海绵类。

胶原蛋白是结缔组织普遍存在的成分，是体内重要的结构蛋白之一，是器官和组织必不可少的构造骨架。按材料结构与组成分，以胶原为原料制成的创伤修复材料目前是国际市场的主流产品之一，作为细胞外基质的重要组成部分，其在烧创伤和组织修复领域展现了较大的优势，具有巨大的应用价值。胶原作为敷料应用于创伤修复通常具有以下特点：(1)低抗原性、生物相容性好，不会引起异物、炎症和排斥反应，可较长时间地用于创面覆盖；(2)具有类似真皮的形态结构，透水透气性好，粘附性好；(3)具有网状的三维空间结构，为创面愈合提供良好的愈合环境，有利于细胞的增生与修复，加速创面愈合；(4)降解产物安全，为组织的生长提供丰富的营养物质；(5)改善愈合质量，抑制过度的成纤维细胞生长，并能减少创面收缩。

但是现有的胶原为原料制成的创伤修复材料机械性能和抗降解性能较差，通气性较差，严重影响敷料的快速推广。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的胶原为原料制成的创伤修复材料机械性能和抗降解性能较差，通气性较差，严重影响敷料的快速推广的缺陷，提供一种胶原蛋白-硫酸乙酰肝素复合敷料的制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

一种胶原蛋白-硫酸乙酰肝素复合敷料的制备方法，包括以下步骤：

1)、制备6～18mg/mL的胶原溶液，连续搅拌12h以上；

2)、将搅拌均匀的胶原溶液装入离心杯中，离心，脱泡，然后灌注到模盒中，并冷冻干燥，得到胶原海绵；

3)、将冷冻干燥后的胶原海绵于110～125℃真空热交联48～72h；

4)、配置0.5～10mM的EDC/NHS交联液，并添加胶原海绵质量的10～20％的硫酸乙酰肝素，搅拌溶解，放入胶原海绵二次交联12～36h；

5)、弃交联液，将胶原海绵先用注射水冲洗2～3遍，再置于注射水中清洗，每100片需15L～25L注射水，每隔3～4h更换一次注射用水，更换6～8次；

6)、将清洗完毕后的胶原海绵置于模盒中，铺平整，并注入20～35mL注射水，使注射水浸润海绵上表面，放入冻干机中，二次冻干；

7)、将二次冻干的海绵放入真空干燥箱内进行干燥；

8)、将冻干后胶原海绵装入灭菌复合袋中，依次排列于压制机板层中，压制 5～10min后，即可制得胶原蛋白-硫酸乙酰肝素复合敷料，装入灭菌复合袋中，辐照灭菌。

进一步的，所述步骤1)中胶原溶液的制备方法采用专利法为 ZL201110361034X的制备方法，具体如下：

(1)取新鲜组织(猪皮、牛皮、牛跟腱等)，切割清除油脂层和毛皮层，去除杂质，清洗，将组织破碎成小颗粒状，按照固液比1:30～1:40的比例，加入0.01～0.03mol/L的氢氧化钠水溶液，于6～8℃浸泡1～2小时，过滤，备用；

(2)在上述预处理后的组织中加入质量为组织质量6～8倍的无水乙醚或者丙酮，于35～40℃回流5～8小时，之后用蒸馏水冲洗至无异味，备用；