[发明专利]一种改造腈水合酶及其应用

权利要求书

1.一种改造腈水合酶，其特征在于，通过将原腈水合酶的β亚基第215位氨基酸和α亚基第133位氨基酸之间形成二硫键改造而成；所述原腈水合酶的α亚基的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列；所述原腈水合酶的β亚基的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的改造腈水合酶，其特征在于，所述二硫键形成的方法为：将SEQID NO:1所示氨基酸序列的215位Asp置换为Cys，将SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的133位Pro置换为Cys。

3.一种编码权利要求1或2所述改造腈水合酶的基因。

4.根据权利要求3所述的改造腈水合酶的基因，其特征在于，所述编码改造腈水合酶基因序列如SEQ ID NO:3所示。

5.一种含有权利要求3所述编码改造腈水合酶基因的表达载体。

6.一种含有权利要求3所述编码改造腈水合酶基因或含有权利要求5所述表达载体的转化体。

7.根据权利要求6所述的转化体，其特征在于，所述转化体的构建方法为：将含有权利要求3所述编码改造腈水合酶基因直接插入受体菌的染色体，或采用氯化钙法或电穿孔转化法将含有权利要求5所述编码改造腈水合酶基因的表达载体导入受体菌。

8.根据权利要求7所述的转化体，其特征在于，所述受体菌为大肠杆菌、红球菌、诺卡氏菌或丙酸棒杆菌。

9.权利要求6-8任一项所述转化体在制备丙烯酰胺中的应用。

10.权利要求1或2所述改造腈水合酶在制备丙烯酰胺中的应用。