[发明专利]一种黑脉羊肚菌膳食多酚的制备方法

说明书

本发明公开了一种黑脉羊肚菌膳食多酚的制备方法，方法包括黑脉羊肚菌的预处理、膳食多酚的一步提取、膳食多酚的纯化。有益效果为：制备的黑脉羊肚菌膳食多酚品质高，抗氧化性能强，本发明优化了传统工艺中黑脉羊肚菌中的游离酚和结合酚的分步提取，采用一步法提取黑脉羊肚菌膳食多酚，简化了工艺过程，且制备过程中所加的活性多肽增加了黑脉羊肚菌膳食多酚的稳定性，提高了收率，使资源得到了最大化利用，降低了生产成本，为工业化应用提供了有利条件。

技术领域

本发明涉及植物活性成分提取技术领域，尤其是涉及一种黑脉羊肚菌膳食多酚的制备方法。

背景技术

黑脉羊肚菌属盘菌目羊肚菌属，主要分布于我国云南、四川、新疆、甘肃、西藏、青海等地，欧洲及北美东部亦有分布，是一种名贵的野生食药用真菌。黑脉羊肚菌富含蛋白质、维生素及多种必需氨基酸，并含有钾、钠、钙、镁和锌、铁等多种常量和微量元素。研究表明黑脉羊肚菌多酚含量丰富，多酚结构中存在的羟基基团可与体内自由基结合，从而消灭自由基，因而具有抗氧化、抗癌等功能活性，并成为国内外研究的热点。

现有技术中，卢可可（不同产地尖顶羊肚菌多酚组成及抗氧化活性研究[J]. 食品科学，2015，36: 6～12）采用两步法提取黑脉羊肚菌多酚，过程中首先提取游离酚，接着在碱性条件下提取结合酚，该工艺复杂，且制备过程中黑脉羊肚菌多酚不稳定，易分解，导致最终产品的收率低，提高了工艺成本，经济效益低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种工艺过程少、产品纯度大、经济效益高的黑脉羊肚菌膳食多酚的制备方法。

本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：一种黑脉羊肚菌膳食多酚的制备方法，所述方法包括黑脉羊肚菌的预处理、膳食多酚的一步提取、膳食多酚的纯化。一步提取黑脉羊肚菌膳食多酚，简化了工艺过程，降低了生产成本，为工业化应用提供了有利条件。

作为优选，黑脉羊肚菌的预处理过程中，黑脉羊肚菌采摘后10～12h内速冻，于-15～-20℃条件下冻藏，操作前取出冷冻黑脉羊肚菌于60～70℃烘箱烘干至恒重量，用中药粉碎机粉碎，过70～75目筛后密封备用。常温条件下，黑脉羊肚菌膳食多酚在贮藏期会急剧下降，导致最终产品的产率极低，造成了资源的浪费。

作为优选，膳食多酚的一步提取过程中，取0.1～0.2mol/L乙酸钠缓冲液25～35份，向其中加入2～4份黑脉羊肚菌粉体，搅拌3～6min，再加入30～35份正己烷，静置5～8min后搅拌15～20min，在4000～4200r/min下离心5～10min，除去脂肪层，再向其中加入210～240U/g的单宁酸酶，在35～40℃下水解20～24h，接着加入50～70份体积比为2/1～1/1的丙酮与乙酸乙酯的混合液，静置5～10min后搅拌提取15～20min，将其在6000～6200r/min下离心10～15min，收集上清液，抽滤后于40～45℃旋转蒸干，用30～35份甲醇定容，过0.4～0.45µm有机滤膜后，贮于-85～-90℃条件下备用。采用酶法提取黑脉羊肚菌中的多酚，安全无毒，提高了黑脉羊肚菌膳食多酚的食药价值，增加了制备方法的经济效益。

作为优选，膳食多酚的纯化过程中，将上步过滤所得的滤液通过交换树脂，并用混合洗脱剂洗脱，向洗脱液中加入5～10份活性多肽，经减压浓缩干燥，得黑脉羊肚菌膳食多酚。交换树脂对黑脉羊肚菌膳食多酚有较好的吸附和解吸性能，能在较短时间内完成对多酚的吸附和解吸作用，缩短了黑脉羊肚菌膳食多酚的制备时间，利用工业化应用。

作为优选，黑脉羊肚菌膳食多酚的制备中，所加入活性多肽的氨基酸序列为HSHACACRARRCGYYVSKAHCRRARRCGYYVSHRGRCYCRCLRCRVLHPGKLCVCVNCSR。黑脉羊肚菌膳食多酚活性强，很不稳定，活性多肽的加入提高了黑脉羊肚菌膳食多酚的稳定性，增加了工艺过程的收率，且掩盖了制备过程中所产生的臭味，提高了工艺过程的应用价值。