[发明专利]一种在蛋白纳米笼内部包装外源物质的方法

权利要求书

1.一种在蛋白纳米笼内部包装外源物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：测出蛋白笼的临界组装浓度；

S2：将蛋白笼解聚成寡聚体，用组装缓冲液稀释寡聚体，直至蛋白笼组分的浓度低于临界组装浓度；

S3：向稀释的寡聚体中加入外源物质并混匀，得到混合物，浓缩该混合物，直至蛋白笼组分的浓度高于临界组装浓度使组装暨包装发生，纯化即可。

2.根据权利要求1所述的一种在蛋白纳米笼内部包装外源物质的方法，其特征在于：所述步骤S1中，蛋白笼的临界组装浓度的测定包括以下步骤：

S11：配制系列蛋白笼组分浓度呈梯度变化的寡聚体溶液，并分别透析到组装缓冲液中，得到蛋白液；

S12：将蛋白液离心并取上清液，将上清液作为超滤初始液进行超滤，取滤过液；

S13：以蛋白笼组分浓度的自然对数为横坐标，滤过液与超滤初始液的蛋白浓度比值为纵坐标，作散点图，拟合玻尔兹曼类型的曲线，曲线斜率绝对值最大时横坐标对应的蛋白浓度即为临界组装浓度。

3.根据权利要求2所述的一种在蛋白纳米笼内部包装外源物质的方法，其特征在于：所述步骤S12中，蛋白液离心转速为10000rpm，离心时间为10-30min，超滤上清液的超滤管截留分子量为100KD，超滤转速为4000rpm，超滤时间为10-30min。

4.根据权利要求1所述的一种在蛋白纳米笼内部包装外源物质的方法，其特征在于：所述步骤S3中，用聚乙二醇20000浓缩混合物，直至蛋白笼组分的浓度高于临界组装浓度，使组装暨包装发生，采用蔗糖密度梯度离心的方法纯化包装后的产物。

5.根据权利要求2或3所述的一种在蛋白纳米笼内部包装外源物质的方法，其特征在于：所述浓缩混合物及超滤上清液的过程均在4℃环境下进行。