[发明专利]一种药食真菌菌丝多糖多肽免疫增强剂的制备方法

说明书

一种药食真菌菌丝多糖多肽免疫增强剂的制备方法，该方法包括菌丝多糖多肽的物理方法与酶解相结合的高效提取、乙醇沉淀分离、左旋咪唑和高浓度乙醇分别沉淀纯化、复合免疫增强注射剂的配伍制剂等步骤。可与疫苗混合或配合注射剂提高动物免疫，生产效率高，相对生产成本低。本发明开发的松乳菇菌丝多糖基于其组成单糖较简单，可以进一步分解制备稀有功能性单糖，工艺简单。

技术领域

本发明涉及一种药食真菌菌丝多糖多肽免疫增强剂的制备方法。

背景技术

食药真菌功能物质：食药真菌中富含蛋白质、氨基酸、脂肪、维生素及微量元素等营养物质外,还含有大量多糖、多肽、核苷、萜类等活性物质，其中分离和纯化产物,表现出很强的抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、抗病毒、抗细菌和抗其它寄生虫功能,还有治疗糖尿病、心血管病和高胆固醇症的作用，具有防病、治病和调节人体生理机能的功效。近年来国内外学者们对食用菌中的活性物质的研究十分火爆，尤其对食用菌中的生物活性多糖、活性蛋白多肽的研究越来越多，食用菌作为保健食品进入了人民大众的生活中。随着大型真菌发酵工艺的成熟，对药食真菌活性物质的提取从子实体转向发酵菌丝体。

多糖：多糖又称聚多糖(polysaccharidc),由单糖聚合成，聚合度大于10的极性大分子，分子量为数万至数百万，是构成生命活动的4大基本物质之一，是自然界含量最丰富的生物聚合物，几乎存在于所有生物体中。多糖与生命的多种生理功能密切相关，不仅为生物提供骨架结构和能量来源，还参与细胞各种生理过程的调节。许多功能性多糖具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗病毒、抗癌和免疫调节等功能。真菌多糖是重要的一类，系从真菌子实体、菌丝体、发酵液中分离出来的，包括酵母多糖、香菇多糖、裂殖多糖、灵芝多糖、黑木耳多糖、灰树花多糖等。

多糖与蛋白质一样结构分子复杂，蛋白质由20种氨基酸组成，而多糖由上百种单糖(单糖按碳原子数分为3、4、5、6碳糖，按官能团分为酮糖和醛糖，酮糖和醛糖基于手性碳原子可形成2ⁿ个对映体…等)，通过不同的糖苷键(α—1，4；β—1，3；β—1，4；β—1，6；α—1，6等糖苷键)构建成含10个以上单糖(自然界多糖多为80—100个单糖组成)的结构物；其结构有直链型和支链型，进而形成不同的立体结构。因此，多糖种类繁多，性质千差万别。多糖的理化性质分析包括分子量测定和结构分析，前者因多糖分子量不均一性而比较困难，通常所测得的分子量一般只能是一种统计平均值；后者有化学方法(酸水解法、甲基化反应、碱降解法)和物理分析法(红外光谱、核磁共振、质谱、气相色谱、紫外光谱等)。还有，比旋光测定常用作α或β苷键的判断，X射线衍射分析法、激光喇曼光谱法、热谱法等用来分析多糖链的结构。近年来，对天然多糖的分子组分及结构有不少研究，但多糖结构的研究起步比蛋白质研究晚，且测定方法更复杂，难度更大。因此，至今许多重要多糖的组成结构不清，或不同的测定存在差异，如贵红2003年报道的松乳菇子实体多糖为葡萄糖、果糖、半乳糖和甘露糖等单糖^[12]，但丁祥等2012年的专利报道是甘露糖与木糖以3:1组成^[24]，二者差异很大。