[发明专利]一种环阿屯型三萜化合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.如式(I)所示的环阿屯型三萜28,29-降甲基-3β,4β-二羟基-9,19-环阿屯烷-26-酸：

2.如权利要求1所述式(I)所示环阿屯型三萜28,29-降甲基-3β,4β-二羟基-9,19-环阿屯烷-26-酸的制备方法，其特征在于，所述制备方法按如下步骤进行：

(1)甲醇浸提：将粉碎干燥后的古羊藤藤茎与甲醇以料液质量体积比1：3～5混合，常温浸提5～10天，过滤得到甲醇提取液，滤渣重复浸提2～4次，合并每次所得甲醇提取液，减压蒸干，得到甲醇浸膏；

(2)乙酸乙酯萃取：将步骤(1)所得甲醇浸膏分散于水中，再用乙酸乙酯萃取，萃取后的水相减压蒸干，得到水相浸膏；

(3)大孔树脂层析：用D-101型大孔树脂对步骤(2)所得水相浸膏进行柱层析分离，分别以纯水，体积分数30％、60％、90％的乙醇水溶液为洗脱剂，进行梯度洗脱，收集体积分数60％的乙醇水溶液的洗脱液，减压蒸除溶剂得大孔树脂层析产品；

(4)一次柱层析：对步骤(3)所得大孔树脂层析产品进行柱层析分离，以200～300目硅胶为柱填料，二氯甲烷/甲醇/水的混合液为洗脱剂，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液，减压蒸除溶剂得一次柱层析产品；

所述梯度洗脱的操作方法为：以二氯甲烷/甲醇/水体积比12：1：0.01、6：1：0.01、3：1：0.01、1：1：0.01的混合液为洗脱剂，进行梯度洗脱，洗脱剂的流速为2～3mL/min，每种梯度的洗脱剂的洗脱时间为400～500min，收集含目标化合物的洗脱液，减压蒸除溶剂得到一次柱层析产品；

(5)二次柱层析：对步骤(4)所得一次柱层析产品再次进行柱层析分离，以200～300目硅胶为柱填料，二氯甲烷/甲醇的混合液为洗脱剂，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液，减压蒸除溶剂得到二次柱层析产品；

所述梯度洗脱的操作方法为：以二氯甲烷/甲醇体积比分别为18：1、14：1、10：1、4：1的混合液为洗脱剂，进行梯度洗脱，洗脱剂的流速为1～2mL/min，每种梯度的洗脱剂的洗脱时间为300～400min，收集含目标化合物的洗脱液，减压蒸除溶剂得到二次柱层析产品；

(6)洗涤除杂：将步骤(5)所得二次柱层析产品用甲醇、二氯甲烷进行洗涤除杂，最后干燥得到式(I)所示的环阿屯型三萜28,29-降甲基-3β,4β-二羟基-9,19-环阿屯烷-26-酸。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)乙酸乙酯萃取的操作方法为：将步骤(1)所得甲醇浸膏分散于5～10倍质量的水中，得到悬浮液，用等体积的乙酸乙酯萃取3次，取萃取后的水相减压蒸干，得到水相浸膏。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述梯度洗脱的操作方法为：以纯水，体积分数30％、60％、90％的乙醇水溶液为洗脱剂，进行梯度洗脱，洗脱剂的流速为15～20mL/min，每种梯度的洗脱剂的洗脱时间为500～600min，收集体积分数60％的乙醇水溶液的洗脱液，减压蒸除溶剂得大孔树脂层析产品。

5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(6)洗涤除杂的操作方法为：将所述二次柱层析产品和甲醇按料液质量体积比1：1.5～2加入离心管中，40KHz超声10s，再向离心管中加入溶剂甲醇1～3倍体积量的溶剂二氯甲烷，震荡摇晃，静止分层后去除有色的上层液体，将下层液体干燥得到产物。

6.如权利要求1所述式(I)所示环阿屯型三萜28,29-降甲基-3β,4β-二羟基-9,19-环阿屯烷-26-酸在制备抗肿瘤活性药物中的应用。