[发明专利]一种胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶突变体及其基因和应用有效
| 申请号： | 201710441642.9 | 申请日： | 2017-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN107502601B | 公开（公告）日： | 2020-04-21 |
| 发明（设计）人： | 张会图;路福平;张莹;孙同韦 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N9/20 | 分类号： | C12N9/20;C12N15/55;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 赵瑶瑶 |
| 地址： | 300222 天津市河*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 胰蛋白酶 抗性 改良 脂肪酶 突变体 及其 基因 应用 | ||
1.一种定点突变的脂肪酶突变体，其特征在于，将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的脂肪酶的第36位的赖氨酸突变为甘氨酸且第39位的赖氨酸突变为苏氨酸。
2.一种定点突变的脂肪酶突变体，其特征在于，将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的脂肪酶的第63位精氨酸突变为甘氨酸。
3.一种定点突变的脂肪酶突变体，其特征在于，将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的脂肪酶的第36位的赖氨酸突变为甘氨酸，第39位的赖氨酸突变为苏氨酸，且第63位精氨酸突变为甘氨酸。
4.一种定点突变的脂肪酶基因，其特征在于，其编码权利要求1所述的定点突变的脂肪酶突变体，基因核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
或权利要求2所述的定点突变的脂肪酶突变体，基因核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；
或权利要求3所述的定点突变脂肪酶突变体，基因核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
5.包含权利要求4所述脂肪酶突变体基因的重组载体及重组菌株。
6.包含权利要求4所述脂肪酶突变体基因的重组菌株。
7.根据权利要求6所述的重组菌株，其特征在于，所述重组菌株为毕赤酵母。
8.一种制备胰蛋白酶抗性改良的脂肪酶lipY2-m的方法，其特征在于，包括以下步骤
⑴用权利要求5的重组载体转化宿主细胞，得重组菌株；
⑵培养重组菌株，诱导重组定点突变的脂肪酶lipY2-m的表达；
⑶回收并纯化所表达的定点突变的脂肪酶lipY2-m。
9.权利要求1或2或3所述的定点突变的脂肪酶突变体在制备治疗胰腺炎的药物方面中的应用。
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