[发明专利]一种固相合成戈那瑞林的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种合成戈那瑞林的方法。

背景技术

戈那瑞林，其化学名称为5’-氧代脯氨酰-L-组氨酰-L-色氨酰-L-丝氨酰-L-酪氨酰-甘氨酰-L-亮氨酰-L-精氨酰-L-脯氨酰-甘氨酰胺，分子式为C₅₅H₇₅N₁₇O₁₃；分子量为1182.33。

戈那瑞林为人工合成的促性腺激素释放素（GnRH），属肽类化合物，和哺乳动物下丘脑分泌的促性腺激素释放激素天然提取物的结果完全相同。戈那瑞林肌注之后可发挥与纯天然激素类似的效果，促性腺激素释放素由丘脑下部以脉冲方式分泌进入垂体门脉系统到垂体前叶，与垂体促性腺激素细胞上的高亲和力受体特异结合，促进动物垂体前叶促卵泡素（FSH）和促黄体素（LH）的合成和分泌。通过提高普通的下丘脑-垂体功能，改善动物总体受精率，从而恢复卵泡的正常生长和成熟，主要用于动物卵泡囊肿的治疗。2010年，农业部批准戈那瑞林原料药及其制剂为国家第三类新兽药

目前有关戈那瑞林合成的报道较少。中国专利CN105646671A公开了SPE柱和反相色谱柱相结合进行梯度洗脱纯化，得到较高纯度的戈那瑞林的纯化方法。本发明的目的在于提供一条适于规模化生产的戈那瑞林合成方法，解决该产品生产过程中粗肽纯度低，产品不易控制、收率不高等问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种从全固相法合成戈那瑞林的方法，具体为采用高效的裂解后能够保留氨基的Rink Amide AM树脂作为固相载体，在缩合试剂和碱试剂的作用下，从C端到N端逐一延伸偶联上带有Fmoc保护基的氨基酸，得到全保护肽树脂，再通过一步法进行裂解与脱保护得到戈那瑞林粗品，经过分离制备得到戈那瑞林精品。具体步骤如下：

步骤1、保护的Gly在缩合试剂和碱试剂作用下与高效的Rink Amide Am Resin树脂进行偶联反应，得到肽树脂1；

步骤2、按照戈那瑞林氨基酸序列C端到N端的顺序，从肽树脂1出发，在缩合试剂和碱试剂作用下，将保护的Pro、保护的Arg (Pbf)、保护的Leu、保护的Gly、保护的Tyr (tBu)、保护的Ser (tBu)、保护的Trp (Boc) 、保护的His (Trt)和pGlu进行逐一延伸偶联，得到保护的戈那瑞林树脂；

步骤3、保护的戈那瑞林肽树脂经酸解剂一步法进行裂解与脱保护得到戈那瑞林粗品；

步骤4、戈那瑞林粗品经纯化转盐后得戈那瑞林精品；

上述方法中，所述保护的Pro、保护的Arg (Pbf)、保护的Leu、保护的Gly、保护的Tyr (tBu)、保护的Ser (tBu)、保护的Trp (Boc) 、保护的His (Trt)和pGlu如下：Fomc-Gly； Fmoc-Pro；Fmoc- Arg (Pbf)；Fmoc-Leu；Fmoc-Gly；Fmoc- Tyr (tBu)；Fmoc-Ser (tBu)；Fmoc- Trp (Boc)；Fmoc- His (Trt) ；pGlu-OH。如：Fmoc- Trp (Boc)的结构为：，Fmoc保护了氨基酸中的氨基，括号中的Boc保护了氨基酸中除羧基外的其他的活性氢；Fmoc- Arg (Pbf)、 Fmoc- Tyr (tBu)、Fmoc-Ser (tBu)、Fmoc- Trp (Boc)、Fmoc- His (Trt)均是如此。

上述方法中，所述缩合试剂为N,N-二异丙基碳二亚胺（DIC）、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷/有机碱(PyBOP)、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐/有机碱(HBTU)、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯/有机碱(TBTU)中的一种或几种，优选苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐。

上述方法中，所述有机碱为N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)、三乙胺(TEA)、2,4,6-三甲基吡啶或N-甲基吗啡啉(NMM)中的一种或几种，优选N,N-二异丙基乙胺。

上述方法中，所述的反应体系选择易溶解原料的非质子性溶剂，包括氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃、乙酸乙酯、N,N-二甲基甲酰胺中的任意一种，优选N,N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷。

上述方法中，所述缩合试剂的摩尔用量优选为多肽树脂中氨基总摩尔数的1～6倍，更优选为1.5～2.5倍。

上述方法中，所述碱试剂的摩尔用量优选为多肽树脂中氨基总摩尔数的1～6倍，更优选为1.5～2.5倍。